クロルプロマジン試験法

1.装置
 液体クロマトグラフ・タンデム質量分析計を用いる。

2.試薬・試液
 次に示すもの以外は,第2 添加物の部C 試薬・試液等の項に示すものを用いる。
セトニトリル 液体クロマトグラフ用に製造したものを用いる。
酸性陽イオン交換体ミニカラム(500mg) 内径8〜9mmのポリエチレン製のカラム管に,ベンゼンスルホニルプロピルシリル化シリカゲル500mgを充てんしたもの又はこれと同等の分離特性を有するものを用いる。
 液体クロマトグラフ用に製造したものを用いる。
タノール 液体クロマトグラフ用に製造したものを用いる。

3.標準品
酸クロルプロマジン 本品は塩酸クロルプロマジン98%以上を含む。
 融点 本品の融点は194〜196℃である。

4.試験溶液の調製
a 抽出法
 検体を細切均一化した後,その5.00gを量り採り,酢酸エチル25ml及び4mol/l炭酸カリウム溶液1mlを加えて細砕した後,毎分3,000回転で5分間遠心分離し,酢酸エチル層をすり合わせ減圧濃縮器中に採る。残留物に酢酸エチル25mlを加え,上記と同様に細砕,遠心分離し,酢酸エチル層を減圧濃縮器中に合わせて,40℃以下で酢酸エチルを除去する。この残留物にアセトニトリル30ml及びアセトニトリル飽和-ヘキサン30mlを加えて,振とう機を用いて5分間激しく振り混ぜた後,静置し,アセトニトリル層を100mlの分液漏斗に移す。これにアセトニトリル飽和-ヘキサン30mlを加え,上記と同様に操作して,アセトニトリル層をすり合わせ減圧濃縮器中に採り,40℃以下でアセトニトリルを除去する。この残留物にメタノール及び1.2%メタリン酸溶液の混液(2:3)10mlを加えて溶かし,綿栓ろ過する。
b 精製法
 強酸性陽イオン交換体ミニカラム(500mg)に,メタノール3ml及び水3mlを順次注入し,流出液は捨てる。このカラムにa 抽出法で得られた溶液を注入した後,水5mlを注入し,流出液は捨てる。このカラムにメタノール及び0.1mol/lリン酸二カリウム溶液の混液(9:1)15mlを注入し,溶出液をすり合わせ減圧濃縮器中に採り,40℃以下で水及びメタノールを除去する。この残留物にメタノール1.0mlを加えて溶かし,これを試験溶液とする。

5.操作法
a 定性試験
 次の操作条件で試験を行う。試験結果は標準品と一致しなければならない。
操作条件
ラム充てん剤 オクタデシルシリル化シリカゲル(粒径2〜5μm)を用いる。
ラム管 内径2.0〜6.0mm,長さ100〜250mmのステンレス管を用いる。
ラム温度 40℃
動相 アセトニトリル,ギ酸及び水の混液(500:1:500)を用いる。クロルプロマジンが約15分で流出する流速に調整する。
b 定量試験
 a 定性試験と同様の操作条件で得られた試験結果に基づき,ピーク高法又はピーク面積法により定量を行う。

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