文献番号：051
タイトル：Characterization of Listeria monocytogenes strains isolated from Gorgonzola cheese rinds
邦訳タイトル：ゴルゴンゾーラチーズのリンド部分から分離されたListeria monocytogenes株の特徴
著者：Carminati D., A. Perrone, G. Giraffa, E. Neviani, G. Mucchetti
誌名､発行年、巻号頁：Food Microbiology (2004), 21, 801-807

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査の目的\n　
　
異なる工場で製造されたチーズの表面から分離された菌株について、生物型（病原因子による）、血清型、遺伝子型によって分類し、その特徴をみる。
　
<ITEM2> \n検体名\n　
　
ゴルゴンゾーラチーズ
　
<ITEM3> \nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
1ロット（1製造日）当たりランダムに最低10個のチーズリンドをナイフで削り取り、合わせて1検体とした。24工場から収集した合計96検体のチーズを試験に用いた。
　
<ITEM4> \n検査検体数\n　
　
ゴルゴンゾーラチーズリンド96検体
　
<ITEM5> \n検査法\n(増殖の有無､培地､培地の温度)\n　
　
1)L. monocytogenesの分離・同定：検体25gをEB培地225ml中で30℃24-48時間培養し、次いで培養液0.1mlをEB培地10ml中に接種して、30℃24時間培養。1白金耳量をALOA培地表面に塗抹し、37℃24時間培養。推定陽性コロニー3個をTSA平板に植え継ぎ、37℃24時間培養した。L. monocytogenesの同定はMono Confirm Test(Biolife)キットによる生化学性状試験により実施。確定されたものから1株を代表株とした。
2)PCR法による同定および遺伝子型別：PCRはリステリオシンO遺伝子の750bpの増幅を行った。遺伝子型別は、RAPD法にて実施
3)血清型別：デンカ生研の型別キットを使用。
4)Phosphatidylcholine phospholipase C(PC-PLC)活性：5%卵黄含有BHI上で37℃72時間培養して確認。
5)Phosphatidylinositol-specific phospholipase C活性：Tryptone Yeast Extract Agar上で37℃24時間培養した後、基質含有のアガロースを重層して37℃5日培養して実施。
6)溶血活性：5%馬脱繊維血液加コロンビア血液寒天を使用。また、C-PGYBブロスの培養上清から、マイクロタイタープレート法により力価を求めた。
　
<ITEM6> \n結果\n(汚染実態、汚染菌の性状、防除対策等)\n　
　
96検体中43検体（44.8%）がLM陽性となった。生物型、血清型などの従来の分類指標で特徴づけることは困難であった。全株とも溶血反応を示し、リパーゼ活性もあった。生物型と製造工場との関連性はなかった。血清型は43株全て1/2a型であった。遺伝子型でみると、RAPD-PCR解析で類似度80%以上を同じグループとした場合、43株は5グループに分類され、工場との相関は見られなかった。
　
<ITEM7> \nPubMed\n
　
Food Microbiology, 21, 801
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=search&term=Food+Microbiology,+21,+801

