文献番号：091
タイトル：Response of Escherichia coli O157:H7,Listeria monocytogenes, Salmonella Typhimurium, and Staphylococcus aureus to the Thermal Stress Occurring in Model Manufactures of Grana Padano Cheese
邦訳タイトル：グラナパダーノチーズのモデル製造において起こる熱ストレスに対するEscherichia coli O157:H7、Listeria monocytogenes、Salmonella TyphimuriumおよびStaphylococcus aureusの反応
著者：Ercolini E., Fusco V., Blaiotta G., Sarghini F., and Coppola S. 
誌名､発行年、巻号頁：Journal of Dairy Science (2005), vol. 88, No. 11, 3818-3825

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査の目的\n　
　
グラナパダーノチーズの製造時における温度変化がListeria monocytogenesの生存にどのような影響を与えるかを調べた。
　
<ITEM2> \n検体名\n　
　
グラナパダーノチーズ（生乳、加熱前のカード、55℃・20分間加熱後ホエイ下で40分保持されたカード、脱水後55℃7時間保持されたカード、脱水後45℃・15分間保持しさらに38℃・15分間保持されたカード）
　
<ITEM3> \nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
グラナパダーノチーズ（半径44cm、高さ25cm）の製造工程においてカードを55℃で脱水後、冷却履歴を6時間分析したところチーズの中心部は4時間以上50℃以上が保たれたのに対し、表面の環状部分は15分後に45℃、30分後に38度まで温度が降下した。前者を細菌の生存しにくい条件（最高条件）、後者を細菌が繁殖しやすい条件（最低条件）とした。その後、部分脱脂した生乳500mLに人為的に~E+4cfu/mLのListeria monocytogenesを接種し、モデルスケールのグラナパダーノチーズを製造した。ナチュラルホエイカルチャー、レンネットにより凝集させ、カードを55℃・20分間加熱後ホエイ下で40分保持し脱水した。これを二通り作製し、冷却履歴モデルを元に一方は55℃・7時間保持、他方は45℃・15分間保持しさらに38℃・15分間保持した。コントロールとしてListeria monocytogenesを接種していないチーズも製造した。生乳、加熱前後のカード、55℃で1・4・7時間保持したカード、45℃・15分間後38℃・15分間保持したカードそれぞれより10ｇを採取し、希釈したものを細菌検査のサンプルとした。
　
<ITEM4> \n検査検体数\n　
　
各サンプル×２
　
<ITEM5> \n検査法\n(増殖の有無､培地､培地の温度)\n　
　
Listeria monocytogenesの計測　　生菌数の確認は各サンプルをリステリア選択培地（SR140E）を使用したプレートに塗布し、37℃48時間培養後、コロニー数を計測した。また、14mLのリステリア選択培地層の上に14mLのトリプトン大豆培地を重ねた薄層培地（Kang and FungおよびHajmeer既報）により生菌、および熱ストレスを受けた細胞の検知を行った。
　
<ITEM6> \n結果\n(汚染実態、汚染菌の性状、防除対策等)\n　
　
DNA抽出およびPCR　　培地より菌を採取し培養後‐20℃で冷凍保存。必要により、これを使用し、Wizard DNA purification Kit（Promega社）のプロトコールに従いDNAを抽出した。これを対象としてPCRにより遺伝子増幅を行い、PCR産物はアガロースゲル電気泳動により確認した。
　
<ITEM7> \nPubMed\n
　
Journal of Dairy Science, 88,  3818
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=search&term=Journal+of+Dairy+Science,+88,+3818

