文献番号：050
タイトル：Antimicrobial activity of pediocin-producing Lactococcus lactis on Listeria monocytogenes,Staphylococcus aureus and Escherichia coli O157:H7 in cheese
邦訳タイトル：ペディオシン産生性Lactococcus lactisによるチーズ中でのListeria monocytogenes,Staphylococcus aureus and Escherichia coli O157:H7に対する抗菌効果
著者：E.Rodriguez,J.Calzada,J.L.Arques,J.M.Rodriguez,M.Nunez,M.Medina
誌名､発行年、巻号頁：International Dairy Journal, （2005）, 15, 51-57

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査の目的\n　
　
ペディオシン産生能を形質転換したL.lactisによるL.monocytogenes,S.aureus,E.coli O157:H7に対する抗菌効果を調査する。
　
<ITEM2> \n検体名\n　
　
チーズ
　
<ITEM3> \nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
熟成4,15,30日後に異なる2地点より5gずつサンプリング
 
　
<ITEM4> \n検査検体数\n　
　
6
　
<ITEM5> \n検査法\n(増殖の有無､培地､培地の温度)\n　
　
1）チーズ製造。チーズは低温殺菌乳を使用して6バッチ製造し、L.monocytogenes,S.aureus,E.coli O157:H7を6バッチ全てにE+6cfu mL-1接種した。スターターは市販の中温性乳酸菌カルチャーMA 016を使用し、6バッチ全てに0.1％接種した。1バッチはコントロールとし、5バッチそれぞれにP.acidilactici 347（ペディオシン産出菌）,Lc.lactis ESI 153,Lc.lactis ESI 515（ナイシン産出菌）,Lc.lactis CL1（ペディオシン産出菌）,Lc.lactis CL2（ナイシン及びペディオシン産出菌）を補助スターターとしてそれぞれ1%接種した。
2）細菌数測定。チーズサンプル5gをクエン酸ナトリウム溶液90mlで均質化し。0.1％ペプトン水で段階希釈した。L.monocytogenesについてはPALCAM Listeria selective supplementを添加したPALCAM Listeria agarに接種して37℃48時間培養した。S.aureusについてはRPF SupplementⅡを添加したBaird-Parkerに接種して37℃48時間培養した。E. coli O157:H7についてはselective Cefixime-Tellurite supplementを添加したMcConkey sorbitol agarに接種して37℃24時間培養した。また、8時間、4,15,30日後にpHを測定した。
3）バクテリオシン活性測定。チーズサンプル5gを50℃にて10mlの0.02N HClで均質化し、上清を採取し、-40℃で凍結した。解凍後、上清を1N NaOHでpH6に調整し、上清25μlをLc. lactis MG1614（ペディオシン耐性、ナイシン感受性菌）あるいはEnt. faecalis TAB28（ペディオシン感受性、ナイシン耐性菌）を1%含むMRS培地上の直径5mmのウェルに接種し、嫌気条件で37℃48時間培養し、生育が阻害されている部分の直径を測定し、バクテリオシン活性をmmで表わした。
　
<ITEM6> \n結果\n(汚染実態、汚染菌の性状、防除対策等)\n　
　
熟成30日後、補助スターターなしのコントロールチーズではL.monocytogenes,S.aureus,E.coli O157:H7の菌数はそれぞれ5.30,5.16,4.14log cfu g-1であったが、ペディオシン産生能を形質転換したLc .lactis CL1とLc. lactis CL2ではL.monocytogenesを2.97と1.64log、S.aureusを0.98と0.40log、E.coli O157:H7を0.84と1.69logコントロールチーズより減少させた。ナイシン産生性乳酸菌で製造したチーズはすべて熟成期間中を通してバクテリオシン活性を示した。ペディオシン活性についてはLc. lactis CL1を用いたチーズのみ熟成期間中を通して活性が示された。ペディオシンPA-1は抗菌活性が高いため、乳中で効率よく増殖できる乳酸菌がペディオシン生産できれば、このバクテリオシンはチーズ製造に利用できるであろう。
　
<ITEM7> \nPubMed\n
　
International Dairy Journal, 15, 5１
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=search&term=International+Dairy+Journal,+15,+5１

<LIST1>

50-1.gif

<LIST1>

50-2.gif

<LIST1>

50-3.gif

<LIST1>

50-4.gif


