文献番号：181
タイトル：Growth of Listeria Monocytogenes in Naturally-Contaminated Raw Milk.
邦訳タイトル：自然汚染した生乳中における L.monocytogenesの増殖
著者：Farber, J. M.,  Sanders, G. W.,  Speirs, J. I.,
誌名､発行年、巻号頁：Lebensm Wiss Technol (1990), 23, (3), 252-254

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査の目的\n　
　
自然汚染した生乳を種々の温度で保存した時の L.monocytogenesの増殖を追跡する
　
<ITEM2> \n検体名\n　
　
L.monocytogenesを排出する牛から集めた生乳
　
<ITEM3> \nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
生乳は予め L.monocytogenesを排出すると知られている牛から採取
 
　
<ITEM4> \n検査項目\n　
　
L.monocytogenes菌数、体細胞数
　
<ITEM5> \n検査法\n(増殖の有無､培地､培地の温度)\n　
　
生乳
予め L.monocytogenesを排出することが知られている1頭の牛から採取した。生乳は、4、10、15℃で好気的に保存し、毎日 L.monocytogenes数を計数。全て3連で実施。　世代時間は対数増殖期において次の式を用いて計算。
世代時間＝1/log P2 - logP1/0.301(T2-T1)   T1=P1の時間、　T2=P2の時間　　P1=T1の時のcfu/ml　　P2=T2の時のcfu/ml
 
微生物分析
 L.monocytogenesの分析は、0.1mlの生乳を血液無添加改変McBride寒天と0.5%塩化リチウム加McBride寒天に直接塗沫した。平板を30℃24-48時間培養し、青灰色、スリガラス的外観の典型的リステリアコロニーを確認試験のために選択した。確認試験は既報のように実施。また、乳の塗沫標本について、マウスモノクローナル抗体D5、あるいはウサギ抗 リステリア多価抗血清とペルオキシダーゼ、あるいはFITC共役第2抗体を用いた菌感染-体細胞の試験を行った。
　
<ITEM6> \n結果\n(汚染実態、汚染菌の性状、防除対策等)\n　
　
・保存温度4℃、10℃、15℃における L.monocytogenesの世代時間は各々25.3時間、10.3時間、7.4時間であった。
 
・保存した生乳中のL.monocytogenesの最高菌密度は、保存温度に関係なく、約2.0×E+7cfu/ml乳であった。
 
・乳を採取した牛は、約3年間、103-104cfu/mlの範囲で L.monocytogenesを排出し続けている。その牛の乳房の1/4だけが L.monocytogenesに重度に感染しており、2つの乳区では菌数は少なかった。また、右後方の乳区からはその菌は検出されなかったし、体細胞数も最も低かった。
 
・新鮮試験乳の塗沫標本は、体細胞の約23%は体細胞であり、その10-50%は細胞質中に1-20の L.monocytogenesを含んでいることを示した。15℃で1日後、10℃で2日後、いくらかの菌の細胞内増殖が明らかになった。しかし、15℃2日後、10℃3日後では、マクロファージの多くは衰えて、菌の細胞外凝集が明白になった。そして、完全なマクロファ-ジは5日後には保存温度にかかわらず、殆どいなくなった。
 
・乳工場で加熱処理される直前の生乳中にいるであろう L.monocytogenesの数を見積もるために、本研究で創出した図式を利用することが出来る。　即ち、初期リステリア菌が10cfu/ml、ラグタイムが3日、世代時間が24時間と仮定すると、4℃5日では最終菌数はわずか40cfu/mlであることが予測できる。また、初期菌数が10と100cfu/mlと仮定した場合、平均温度が10℃、ラグタイムが12時間、世代時間が12時間の場合は、最終菌数は、約640と6400cfu/mlになるだろう。
　
<ITEM7> \nPubMed\n
　
Lebensm Wiss Technol, 23, 252
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=search&term=Lebensm+Wiss+Technol,+23,+252

