文献番号：088
タイトル：Survival of Listeria monocytogenes in Milk during High-Temperature, Short-Time Pasteurization
邦訳タイトル：高温短時間殺菌における牛乳中のリステリア・モノサイトゲネスの生残
著者：Doyle M.P., K.A. Glass, J.T. Beery, G.A. Garcia, D.J. Pollard, R.D. Schultz
誌名､発行年、巻号頁：Applied and Environmental Microbiology (1987), 53, (7), 1433-138

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査の目的\n　
　
リステリア・モノサイトゲネス（Lm）を接種した乳牛より搾乳した生乳において、細胞内に取り込まれたLmがHTST殺菌条件下で生残するかを小型プレート殺菌機で検証する。
　
<ITEM2> \n検体名\n　
　
生乳
　
<ITEM3> \nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
4頭のホルスタインの異なった部位に異なった菌数でL.monocytogenes Scott Aを接種した（1頭は接種後死亡）。その後3週間後、左前分房の乳頭管よりリステリアを接種し、さらに5日後に最初の搾乳を行った。2週間後及びその後約1週間毎に4週間にわたって、異なる分房に対して同様に行った。
　
<ITEM4> \n検査検体数\n　
　
12トライアル、各3サンプル
　
<ITEM5> \n検査法\n(増殖の有無､培地､培地の温度)\n　
　
生乳及び超音波あるいは均質化処理した生乳のLm数は、5%ヒツジ脱繊維血加McBride Listeria agar(MLA)に塗抹し、37℃48時間微好気培養して求めた。多形核白血球（PMNL）中のLm数は、免疫ペルオキシダーゼを結合した抗体で特異染色し、顕微鏡下で計測した。生乳の加熱処理は、71.7-73.9℃16.4秒及び76.4-77.8℃15.4秒で行った（クラリファイヤー、均質化なし）。殺菌後の生乳は、5種類の方法でLmの生残を確認した。①トリプトース寒天平板に0.1ml塗抹×10枚、37℃48時間微好気培養　②MLA平板に0.1ml塗抹×10枚、37℃48時間微好気培養　③低温増菌：試料25mlを100mlトリプトースブロスと混合し4℃で培養。1, 2, 3, 4, 6, 8週間目に0.1mlをMLA寒天に塗抹（2枚）。　④FDA法：試料25mlを225mlEnrichment brothと混合し30℃で培養。24及び48時間後に0.1mlをMLA寒天に塗抹（2枚）。また増菌液をアルカリ処理して同様に接種。　⑤選択増菌法：試料25mlを100ml選択増菌ブロスと混合し37℃で振盪培養。1, 2, 3, 5, 7日目に0.1mlをMLA寒天に塗抹（2枚）。
　
<ITEM6> \n結果\n(汚染実態、汚染菌の性状、防除対策等)\n　
　
加熱処理前の生乳12サンプルのうちわずか4サンプルよりLmが検出され、さらに超音波処理等で2検体検出された。菌数は3.0×E+2-1.9×E+4cfu/mlであった。生乳1mlあたりのPMNL中のLm数は、<1.2×E+2-4.8×E+4/ml、PMNL中の平均リステリア数は0-9.2、最大は26であった。加熱処理後のLmの分離状況は、71.7-73.9℃16.4秒処理の場合9トライアル中6トライアルで分離されたが、76.4-77.8℃15.4秒処理では分離されなかった。以上より71.7℃15秒のHTST殺菌ではPMNL中のLmは生残するといえる。
　
<ITEM7> \nPubMed\n
　
Applied and Environmental Microbiology, 53, 1433
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=search&term=Applied+and+Environmental+Microbiology,+53,+1433

<LIST1>

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