文献番号：138
タイトル：Incidence of Listeria and Listeria monocytogenes in acid curd cheese.
邦訳タイトル：酸カードチーズ中のリステリア菌及び L.monocytogenesの発生
著者：Rudolf M, Scherer S
誌名､発行年、巻号頁：Archiv fur Lebensmittelhygiene (2000), 51, 118-120

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査の目的\n　
　
酸カードチーズ中のリステリア菌の発生について調べる
　
<ITEM2> \n検体名\n　
　
Gelbkaeseタイプのチーズ
　
<ITEM3> \nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
地方店で購入もしくは小売業者あるいは製造業者より入手　　　
 
　
<ITEM4> \n検査検体数\n　
　
50試料（41が異なった試料、9は裏づけ試料）
　
<ITEM5> \n検査項目\n　
　
菌数測定、菌の確認試験
　
<ITEM6> \n検査法\n(増殖の有無､培地､培地の温度)\n　
　
サンプリング法：試料は入手後48時間以内にリステリア菌の分析に供した。試料は無菌的に2つに分け、1つはリステリア菌数計測のため、滅菌ポリエチレン袋に入れ、－80℃で凍結した。
リステリア菌の検出：IDFスタンダード 143A-1995に従う。　　チーズ表面の試料25ｇを　50ｍｌの1.75%クエン酸緩衝液(pH7.5)とともにブレンダーで混合する。これを塩酸アクリフラビン10mg/ml、nalidixid酸40mg/ml及びシクロヘキシミド50mg/mlを補強したトリプトンSoya Yeast Extract(TSYE)ブロス175mlに加える。30℃48時間培養後、１白金耳(約10μl)をOxford寒天培地に塗沫し37℃48時間培養する。　リステリアコロニーは特徴的な外観で判定。　典型的なコロニーをチーズあたり５つ選択し、以下の確認テストに供した。（斜光法、グルコース・サリシン・キシロース・ラムノースからの酸生成、β溶血、ファージタイピング）
リステリア菌の計数：計数用の凍結試料を解凍し、表面の定められた部分（20－80ｃ㎡）を1.75%クエン酸3Na2水塩溶液にホモゲナイズする。ANC培地を用いて10倍希釈列を作り、各希釈ごとに3×10mlを滅菌チューブに移し、37℃48時間培養する。各チューブの1白金耳をOxford寒天培地に塗沫し37℃48時間培養して推定コロニーを観察する。チーズ表面ｃ㎡あたりのリステリア菌数の計算には、MPN算出表を用いた。
ファージタイピング：バクテリオファージタイピングスキームを用いた。25の異なったファージを用い、チーズ試料あたり５コロニーをテストした
　
<ITEM7> \n結果\n(汚染実態、汚染菌の性状、防除対策等)\n　
　
・調査は8ヶ月間(1999年6～12月）にわたり、9つの酪農場からの合計50(41の異なった試料9つの確認用試料）の酸カードチーズ試料が調べられた。
・41の異なったチーズ試料中、2試料(4.8%)が L.monocytogenes陽性であり、8試料(19.5%)が L.innocua陽性であった。
・ L.monocytogenes菌数はチーズ表面で10cfu/ｃ㎡以下の数(2試料)しか検出されなかった。
・ L.innocua菌数は、<10cfu/cm２が3試料 、>10cfu/ｃ㎡が3試料、>E+2cfu/ｃ㎡が3試料、>E+3cfu/ｃ㎡ が1試料と菌数に幅があった。
・ファージタイピングにより、2つの異なった L.monocytogenesファージ型と7つの異なった L.innocuaファージ型が識別された。
・適正に殺菌された乳から造られたチーズに、リステリア菌汚染が見つかったことは、製造後の汚染の可能性が大きく、工場の菌の除去が難しい熟成設備に、菌が長期間にわたって存在しているためかもしれない。
・この推測は同一の L.innocuaのファージ型が、同一の酪農場で数ヶ月にもわたって検出されたという事実によって確認された。
　
<ITEM8> \nPubMed\n
　
Archiv fur Lebensmittelhygiene, 51, 118
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=search&term=Archiv+fur+Lebensmittelhygiene,+51,+118

