文献番号：184
タイトル：Listeria Monocytogenes：heat resistance and behaviour during storage of milk and whey and making of Dutch types of cheese
邦訳タイトル：Listeria monocytogenesの熱抵抗性と、生乳、ホエイの冷蔵保存、及び、オランダチーズの製造における挙動
著者：Northolt, M.D., Beckers, H.J., Vecht, U., Toepoel, L., Soentoro, P.S.S.,   Wisselink, H.J.,
誌名､発行年、巻号頁：Netherlands Milk and Dairy Journal (1988),42,207-219

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査の目的\n　
　
1)プレート殺菌における生乳中のListeria monocytogenesの熱抵抗性
2)冷蔵保存における生乳及び殺菌乳中のListeria monocytogenesの挙動
3)Gouda、Maasdamチーズ製造におけるListeria monocytogenesの挙動
　
<ITEM2> \n検体名\n　
　
生乳、HTST殺菌乳、高温殺菌乳、ゴーダチーズ、マースダムチーズ
　
<ITEM3> \nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
1）800Lの殺菌乳にListeria monocytogenes strain 1、13、669及びLM4Bを9.104/ml接種し、64、67、70℃で10秒間プレート殺菌を行った。
 
2）Listeria monocytogenes strain 1、13、669及びLM4Bを培養したTryptose brothをスクリューキャップ付のボトルに1ml入れ、これに、250mlの生乳、HTST殺菌乳（72℃、15秒）、高温殺菌乳（98℃、30分間）、または、加熱ホエイ（68℃、10秒）を加えたサンプルをそれぞれ調製し、ウォーターバスで4℃、または、7℃でインキュベーションを行った。
 
3）・（バット1；Gouda cheese）レンネット温度30℃、クッキング温度35.5℃、0.6% Bos(スターター)を添加、熟成温度13℃、湿度88%R.H　・（バット2；Gouda Cheese）レンネット温度30℃、クッキング温度35.5℃、0.3% Bos添加（酸性化工程における湿度45%（高い湿度条件））、熟成温度13℃、湿度88％R.H.　・（バット3；Maasdam cheese）レンネット温度30℃、クッキング温度35.5℃、0.6% Bos+プロピオン酸産生菌を添加、熟成温度13℃(初めの2週間)、18℃(次の2週間)、湿度88%R.H.。
　
<ITEM4> \n検査検体数\n　
　
-
　
<ITEM5> \n検査法\n(増殖の有無､培地､培地の温度)\n　
　
1）<0.1ml殺菌液>TNSAプレート(trypaflavin-nalidixic acid-serum-agar)にストリークした。 TNSA：1L基礎培地（25g/L nutrient broth No.2(Oxoid)，1.25g/L Na2HPO4・2H2O，19.0g/LBacto agar）に50ml serum hourse、4ml 1% nalidixic acid，4ml 0.2% trypaflavinを加えた培地）　　<1ml、10ml、100ml殺菌液>9倍量のtryptose broth(20g/L tryptose，1g/L glucose，5g/Lsodium chloride pH7.2)と混合し、インキュベーション（30℃）を行った。24時間後、TNSAプレートにストリークして4℃、2週間保存後、再度TNSAプレートにストリークして37℃でインキュベーションを行った。コロニーはBeckerらの方法（既報）により確認した。
 
2）経時的にサンプリングして、peptone-saline solutionと混合し10倍希釈液とした。希釈液0.1mlをTNSAプレートにストリークして37℃、48時間インキュベーションした。
　
3)接種24時間後、2週間後、6週間後に25gのサンプルを採取、ホモジナイズ後、225ml tryptose brothで混合して45℃に加温した。peptpme-saline solutionで10倍希釈液として、0.1mlをTNSAプレートにストリークした。37℃、48時間インキュベーション後、コロニーの計測を行った。
　
<ITEM6> \n結果\n(汚染実態、汚染菌の性状、防除対策等)\n　
　
1）67℃、10秒間殺菌乳100mlから、Listeria monocytogenesが検出された。64℃処理乳1ml−非選択培地から検出されたが、64℃処理乳0.1ml−選択培地からは検出されなかった。
 
2）生乳、HTST殺菌乳からは、1-3日目においてListeria monocytogenesの回復が見られず、遅滞期が存在した。これは、ラクトパーオキシターゼ、リソチーム、凝集素の殺菌作用によるものだと思われる。一方、高温殺菌乳ではこのような遅滞期が生じなかった。加温ホエイでは、7℃、12℃、20℃及び、30℃保存サンプルで、遅滞期12、6、3時間後、及び40分後にListeria monocytogenesの菌数が倍増した。
　
3）生乳に接種したListeria monocytogenesはカード中に10倍濃縮されていた。濃縮分を差し引くと、チーズ中ではバット1、2、及び、3において、それぞれ3.8、5.8、及び、4.2倍に菌数が増殖した。その後、6週間、熟成中の菌数はほぼ一定であった。
　
<ITEM7> \nPubMed\n
　
Netherlands Milk and Dairy Journal,42,207-219
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=search&term=Netherlands+Milk+and+Dairy+Journal,+42,+207-219

<LIST1>

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