文献番号：243
タイトル：Heat Resistance of Listeria Monocytogenes Suspended in Milk.
邦訳タイトル：乳中 L.monocytogenesの加熱処理に対する抵抗性
著者：船渡川圭次、羽石博行、針谷光二、井上智
誌名､発行年、巻号頁：日本獣医師会雑誌 (1992), 45, (10), 792-795

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査の目的\n　
　
加熱処理による菌の抵抗性に関する因子を探る目的で生乳、無菌乳、無菌脱脂乳等に増殖ステージの異なる L.monocytogenesを浮遊させて熱抵抗性を検討する。
　
<ITEM2> \n検体名\n　
　
菌浮遊液（生乳、無菌乳、無菌脱脂乳、リン酸緩衝液(PBS)）に L.monocytogenesを加えて加熱処理したサンプル
　
<ITEM3> \nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
-
 
　
<ITEM4> \n検査項目\n　
　
L.monocytogenes菌数
　
<ITEM5> \n検査法\n(増殖の有無､培地､培地の温度)\n　
　
使用菌液
L.monocytogenes　Y1株 あるいは　同 Y2株の107個をトリプトースソイブロス(TSB)10ｍｌに加え4℃と37℃で培養し、それぞれ4℃では培養後11日（対数期）と5週間（停止期）、37℃では6時間（対数期）と10日（生残期）の菌を使用。
 
加熱方法
浮遊液1.8mlと L.monocytogenes菌液0.2mlを滅菌ガラスチュ−ブに加え（菌濃度は1.1〜9.0×E+6個/ｍｌ）密栓後、60℃の恒温槽で、チューブ内の試料を恒温槽の液面下5mmに維持した場合と、深く埋没させた場合の2種類の加熱処理を行う。　　その前に48℃1時間の予備加熱を行い、菌の熱への抵抗性を調べる。
 
生菌数の測定
希釈した菌浮遊液をトリプトースソイ寒天平板に塗沫し、発生したコロニー数を計測。
 
D値の計測
生菌数のlogを縦軸に、加熱時間を横軸にとり、生菌数曲線のグラフから次式により算出。D=2.303/K　K=2.303(log a -log b)/t、a=加熱0時間の生菌数、b=時間tにおける生菌数
　
<ITEM6> \n結果\n(汚染実態、汚染菌の性状、防除対策等)\n　
　
培養温度と増殖期の比較
4℃、37℃いずれの培養温度においても、菌の増殖時期が対数期にあるものよりも生残期、停止期にあるほうがD値が大きかった。また、4℃培養の菌は、対数期、停止期ともに37℃培養の菌よりD値が低い傾向にあった。このことは、加熱に対する抵抗性において、菌の増殖時期が重要な因子のひとつであることを示唆するものである。
　
浮遊菌液の組成とD値
PBS中よりも生乳中の方がD値が小さく、無菌乳および無菌脱脂乳中の方がD値は大きかった。従って生乳よりも無菌乳・無菌脱脂乳においての方が大きなD値であった。生乳中でD値が非常に低いことは、乳中のラクトペルオキシダーゼやアギュルチニンによる抑制効果と考えられる。　また、無菌乳や無菌脱脂乳でPBSに比してD値が高いのは乳糖や入脂肪の存在が関与すると考えられる。
今回使用した菌株の間や培養温度の違いによってD値に有意な差は見られなかった。
　
予備加熱の影響
加熱前の48℃、1時間の予備加熱を行うと、D値は大きくなったが、生乳の方が無菌乳の場合よりD値の増加が大きかった。
　
以上の結果より、 L.monocytogenesの加熱に対する抵抗性は、菌の増殖時期、汚染した溶液の組成、予備加熱が深く関与することが確認できた。
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=search&term=

