文献番号：54
タイトル：An investigation on the effrect of transport and lairage on the faecal shedding prevalence of <I>Escherichia coli</I> O157 in cattle
著者：Miniham, D.
論文-年：J Vet Med B 50:378-382 (2003)
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調査国：アイルランド


<ITEM1> \n調査目的\n　
　
ウシ糞便中における大腸菌O157の数の変動について、ウシの輸送およびと殺前の繋留の影響を調査する。
 
<ITEM2> \n検体名\nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
アイルランド国内の２コホート（AおよびB)を選抜した。Aでは１０９若ウシを対象とした。農場、輸送直後、繋留しと殺直前にサンプリングした。Aでは輸送に６ｈｒ、繋留に１２ｈｒを要した。繋留中は自由に水を飲ませた。Bでは５９の若ウシを対象とした。輸送に１．５ｈｒ要した。１．５ｈｒの繋留後と殺した。Aでは農場でのサンプリングは、輸送の４ｈｒ前に行った。Bでは１日前に行った。糞便の採取は以下のように行った。グローブをして、直腸に手を入れ、糞便をつかみ、手袋を裏返して袋とした。糞便の入った袋状態の手袋を冷蔵保存ボックスにいれ、検査室に持ち込んだ。その日に細菌検査をした。処理済のと体はスポンジでスワブした。スポンジはPBSで湿らせた。と体外側および内側表面をスワブした。
 
<ITEM3> \n調査対象微生物\n　
　
大腸菌O157
 
<ITEM4> \n検査方法\n増菌の有無\n培地\n　
　
１ｇの糞便を２０ｍｌの緩衝ペプトン水に加え３７℃６ｈｒ培養した。スワブの場合、８０ｍｌの緩衝ペプトン水にスワブを入れ、３７℃６ｈｒ培養した。抗O157抗体を吸着させた免疫磁気ビーズを、１ｍｌの前培養液に加え、洗浄後、ビーズを２５mlのPBSに懸濁後、cefixime telurite sorbitol MacConkey寒天培地上に塗抹し、３７℃で最長１８ｈｒ培養した。コロニーを抗O157血清を用いて凝集試験し、O157であることを確かめた。分離菌株に対し、<I>eaeA、hylA、stx1、stx2</I>遺伝子があるかどうか、PCRした。
 
<ITEM5> \n結果\n汚染実態\n汚染菌の性状\n防除対策等\n　
　
コホートAの成績：農場、輸送（直後）、繋留（と殺直前）のO157陽性率は、それぞれ１８，１３，１２％だった。全箇所陽性牛は６頭、輸送後と繋留陽性が４頭、農場と繋留陽性が３頭で、他のウシはどこかの時点で陽性だった。３点に優位さはない。と体は陰性だった。コホートBの成績：農場、輸送、繋留でのO157陽性率は、１．７、１．７、０％だった。と体からは検出されなかった。４７菌株に対し遺伝子検査したところ、４５株（９５％）がeaeA,hylA,stx1陽性だった。１株がeaeA,hylA,stx2陽性だった。１株が全遺伝子陰性だった。結論として、サルモネラ類と異なり、O157の場合、輸送や繋留が糞便中の菌数を増加させることはなかった。
 
