文献番号：73
タイトル：Monitoring of microbial contamination of beef carcass tissue with a rapid chromogenic Limulus amoebocyte lysate endpoint assay
著者：Siragusa,G.R.
論文-年：Letters in Applied Microbiology 2000 31:178-183(2000)
個票分類：-
調査国：USA


<ITEM1> \n調査目的\n　
　
牛枝肉の微生物汚染のモニタリングにおける、比色ＬＡＬ法の有効性を調査した。
 
<ITEM2> \n検体名\nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
実験１：3頭の牛の糞便各50ｇ（計150ｇ）を150ｍｌの蒸留水と混和、ろ過し、pyrogen-free水で希釈。
希釈液１ｍｌを枝肉に流布し、検体採取まで15分間室温放置。
枝肉表面100ｃ㎡を拭き取り、5mlのpyrogen-free水中で15秒間攪拌。
    
実験2：枝肉100ｃ㎡を拭き取り、5mlのpyrogen-free水中で15秒間攪拌。
 
<ITEM3> \n調査対象微生物\n　
　
一般生菌数、大腸菌群数
 
<ITEM4> \n検査方法\n増菌の有無\n培地\n　
　
比色LAL変法：検体を96ウェルマイクロプレート中で3倍段階希釈。希釈した検体10μlを別プレートに移し10μlのLAL試薬を添加。37℃10分間培養。20μlのLAL比色試薬を添加。37℃6分間培養。405nmの吸光度をマイクロプレートリーダーで測定。

微生物培養法：検体をペプトン水で希釈。希釈液1mlをペトリフィルムACプレート及びペトロフィルムECプレート(3M,Minneapolis,MN,USA)に滴下。37℃24時間培養。
 
<ITEM5> \n結果\n汚染実態\n汚染菌の性状\n防除対策等\n　
　
実験１：LAL法反応に相違なし。
実験2：微生物量（一般生菌数及び大腸菌群数）とLAL変法値との間に直線関係が観察された（P<0.001)。LAL値と一般生菌数との関係（r2=0.90)のほうがLAL値と大腸菌群数との関係（r2=0.73)よりも高い相関を示した。一般生菌数、大腸菌群数の場合ともlog10 1.5cfu/ｃ㎡以上では直線状を呈したが、それ以下の場合は細菌汚染の程度が低いということしかわからなかった。
しかし、LAL値を4つのカテゴリーに分けると、一般生菌数とLAL値との相関には高い有意性が認められた（χ2=42.3、P<0.001）。
現時点で処理業者にとって比色LAL法は細菌培養なしに、処理工程における逸脱を発見し、汚染源を迅速に修正するための正しい方法である。
 
<ITEM6> \nPubMed\n
　
Lett Appl Microbiol, 31, 178
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?orig_db=PubMed&db=PubMed&cmd=Search&term=Lett+Appl+Microbiol%5BJour%5D+AND+31%5Bvolume%5D+AND+178%5Bpage%5D
