文献番号：59
タイトル：Occurrence of <I>Yersinia enterocolitica</I> and <I>Campylobacter</I> spp. in slaughter pigs and consequences for meat inspection, slaughtering, and dressing procedures
著者：Nesbakken, T.
論文-年：Int. J. Food Microbiol. 80: 231-240 (2003)
個票分類：処理場
調査国：ノルウエ－


<ITEM1> \n調査目的\n　
　
1：豚のリンパ組織および消化管における、<I>Yersinia enteroclitica</I>と<I>Campylobacter</I> spp.の保有率を調査し，と畜検査およびと畜の処理過程で両菌の汚染が拡大する危険性について検討した。
2：と場におけるリスクマネージメントのツールとして、従来の培地を用いた分離培養法、PCR法およびELISA法について、その有効性を比較した。
 
<ITEM2> \n検体名\nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
調査期間：1999年7月ならびに2000年11月と2001年１、2月
1999年7月に、12群の健康な豚から下顎リンパ節を97検体採取した。次に、2000年11月と2001年１、2月に、検体採取の2、3週前に、それらの群の豚の扁桃腺から<I>Y. enterocolitica</I> O:3が分離された3群24頭 (1群8頭)から、血液、扁桃腺、下顎リンパ節、腸間膜リンパ節、胃、回腸、盲腸、結腸、糞便およびと体表面から検体を採取した。血液は飼育中に採取した。、腸間膜リンパ節、胃、回腸末端部、盲腸、結腸および糞便は、臓器摘出の際に無菌的に採取した。扁桃腺は舌とともに食道から切り離して採取し、下顎リンパ節はと体の片身から採取した。と体表面からの検体の採取は、大腿、骨盤、腎臓、および頚部をそれぞれ200ｃ㎡スワブすることで行い、その後ペプトン水に懸濁した。
 
<ITEM3> \n調査対象微生物\n　
　
<I>Yersinia enterocolitica、Campylobacter spp.</I>
 
<ITEM4> \n検査方法\n増菌の有無\n培地\n　
　
1.<I>Y. enterocolitica</I>の検出
(1) ISO10273に従い、扁桃腺10g、リンパ節5gおよび消化管内容物10gを、それぞれ1:1となるようにペプトン水に懸濁。→懸濁液1mlをIrgasan-Ticarcillin-potassium chlorate (ITC)増菌培地に1ml接種、25℃、2日間増菌。→<I>Salmonella-Shigella</I>-desoxycholate-calcium chloride (SSDC)およびCefsulodin-Irgasan-Novobiosin (CIN) 培地に増菌液を1白金耳接種。→SSDC培地：30℃、24h培養。 CIN培地：30℃、18－22h培養。→生化学性状により同定。
(2) (1)で用いた検体から、BUGS’n BEADS bacterial DNA isolation kitによりDNA抽出。→病原性<I>Y. enterocolitica</I>の保有する、病原性プラスミドDNAを標的としたPCR。
(3) 血液中の抗<I>Y. enterocolitica</I> O:3抗体をLPS-ELISAにより測定。

1.<I>Campylobacter</I>の検出
(1) NCFAに従い、①と同様の検体をPreston brothに接種、24h増菌。→増菌液をPreston agarおよび<I>Campylobacter</I> blood-free selective (CBFS)培地に接種、24h培養。
(2) <I>Campylobacter</I>の23SrDNAを標的としたプライマーを用いて<I>Y. enterocolitica</I>と同様にPCR。
(3) (1)の増菌液を24h培養。→ELISA (VIDAS CAM法)に供試。
 
<ITEM5> \n結果\n汚染実態\n汚染菌の性状\n防除対策等\n　
　
初めに健康な豚から採取した下顎リンパ節97検体の5.2％および<I>Y. enterocolitica</I>陽性群から採取した下顎リンパ節24検体の12.5％が<I>Y. enterocolitica</I>陽性であった。また、腸間膜リンパ節24検体の8.3％が陽性であった。胃、回腸、盲腸および結腸の内容物からも、病原性<I>Y. enterocolitica</I> O:3が4.2～16.7％の割合で検出された。<I>Campylobacter</I>は全ての豚の腸管から、また、扁桃腺からは66.7％と高率に検出された。これらの結果により、扁桃腺やリンパ節の検査は、病原性<I>Y. enterocolitica</I> O:3および<I>Campylobacter</I>による交差汚染を生じさせる危険性があることが示唆された。また、扁桃腺に病原性<I>Yersinia</I>が存在していたほとんどの豚で、<I>Y. enterocolitica</I> O:3に対する高い血中抗体価を示したことから、血中の抗体価と扁桃腺における病原性<I>Y. enterocolitica</I> の存在には強い関連があると思われた。本研究で用いた病原性<I>Y. enterocolitica</I>および<I>Campylobacter</I>の検出法の間で検出率に有意な差は認められなかった。
 
<ITEM6> \nPubMed\n
　
Int J Food Microbiol, 80, 231
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?orig_db=PubMed&db=PubMed&cmd=Search&term=Int+J+Food+Microbiol%5BJour%5D+AND+80%5Bvolume%5D+AND+231%5Bpage%5D
