文献番号：b-54
タイトル：Analysis of enterotoxin production by <I>Bacillus cereus</I> from dairy products,
　　　　　food poisoning incidents and non‐gastrointestinal infections 
邦訳タイトル：乳製品由来の、および食中毒性、非胃腸感染性の<I>Bacillus cereus</I> による
　　　　　　　エンテロトキシン産生の分析
著者：Granum,　P.E.,
誌名､発行年、巻号頁：International Journal of Food Microbiology,　(1993), <B>17</B>, (4), 269-279
菌種：2.<I>Bacillus cereus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
ノルウェーで製造された乳製品中のB．cereusを単離し、6℃および42℃（冷蔵製品中および人体内を想定）での生育状況と、エンテロトキシン産生能を分析する。　また、エンテロトキシン検出法としてのRPLA（reversed passive latex agglutination）法をウェスタンブロット法およびVPR（Vascular permeability reaction）法と比較し、その有用性を検証する。
　
<ITEM2> \n検体名
 
ノルウェー製の乳製品（脱脂乳、部分脱脂乳、低脂肪クリーム、ホイップクリーム）、およびPHLS食品衛生研究所（イギリス）から提供された食中毒性、非胃腸感染性の　B．cereus
　
<ITEM3>
 
ノルウェー製の乳製品から単離されたB．cereusが85種、およびPHLS食品衛生研究所から提供された食中毒性、非胃腸感染性のB．cereusが25種
　
<ITEM4> \n検査検体数
 
110
　
<ITEM5>
 
＜菌体検出試験＞　平板寒天培地に製品を接種し、6℃および42℃にて一週間培養、モニタリングする。　単離した菌は、B．cereus選択培地でのレクチナーゼ（陽性）反応、マンニトール（陰性）反応、さらに運動性、好気的・嫌気的生育、溶血試験にて同定する。　
＜エンテロトキシン調製法＞　B．cereusをBHIG broth(Brain Heart Infusion medium)中で、32℃、6時間培養する。生成したエンテロトキシンは70%硫酸アンモニウムによる沈殿（硫安分画）にて20倍に濃縮される。それを20mMリン酸バッファーに溶解し透析して、エンテロトキシンを調製する。　
＜エンテロトキシン検出方法＞　RPLA（reversed passive latex agglutination）法　（デンカ生研製：BCET-RPLA TD950）、対照として、ウェスタンブロット法およびVPR（Vascular permeability reaction）法を使用。
　
<ITEM6>
 
ノルウェー製の乳製品から、85種のB．cereusが検出された。うち、50種（59%）はエンテロトキシン産生菌であり、また、13種（15%）は好冷菌であった（6℃にて増殖）。　そのうちの6種（7%）は、両方の性質を持っており、製品中で増殖すると食中毒菌になる可能性があることがわかった。　次に、エンテロトキシン検出法としてのRPLA（reversed passive latex agglutination）法の有用性を検証した。110種の菌を使用し、対照としてウェスタンブロット法およびVPR（Vascular permeability reaction）法にてエンテロトキシン検出試験を行った。結果、104種の菌について、RPLA法とウェスタンブロット法ならびにVPR法の結果が一致した。このことから、RPLA法は、簡便で有用なエンテロトキシン検出法であることが示唆された。
　
<ITEM7>
 
International Journal of Food Microbiology, 17, 269
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=International Journal of Food Microbiology, 17, 269
