文献番号：b-39
タイトル：Consumption by healthy adults of pasteurized milk with a high concentration
　　　　　 of <I>Bacillus cereus</I>: A double-blind study 
邦訳タイトル：-
著者：LANGEVELD　L.P.M
誌名､発行年、巻号頁：Journal of Food Protection, (1996), <B>59</B>, 723-726
菌種：2.<I>Bacillus cereus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
セレウス菌汚染牛乳摂取時の許容菌数レベルを調べるために、34人の健常成人に上記牛乳を摂取させ、胃腸炎の症状とセレウス菌数レベルの関係について調べた。
　
<ITEM2> \n検体名
 
乳製品工場で76℃20秒で殺菌したハーフクリームミルクをカートンに500ml充填したものを7.5℃で3,7,8,12,14日間保存したもの。
　
<ITEM3>
 
ヒトの摂取後に残った試料を冷蔵後、3時間以内に菌数計測した。また、エンテロトキシン測定用に2mlを採取して−20℃で凍結させた。
　
<ITEM4> \n検査検体数
 
259検体(ハーフミルク)
　
<ITEM5>
 
34人(20〜60歳の男性29人と女性5人)のボランティアに冷蔵したセレウス菌汚染牛乳を昼食時に250〜450ml摂取させた。試験はウイークデイに1日置きに3回摂取させ、3週間行った。生菌数はスパイラルプレーターを用い測定した。原液及び100倍希釈液を試料とした。1%スキムミルクを添加したPCAを用い、30℃で培養して1及び3日目にコロニー計測を行った。セレウス菌は1日目にコロニー形態により菌数計測した。E+6cfu/ml以上のセレウス菌が検出された牛乳からセレウス菌を分離し、MYP培地及びISO 7932に記載の追加試験によりセレウス菌の確認を行った。分離セレウス菌株を0.1%グルコース添加BHIで30℃12時間振とう(100rpm)培養後、下痢型エンテロトキシンをELISA法(Tecra)により定量した。同様に、セレウス菌汚染牛乳試料中のエンテロトキシンの有無をELISA法により確認した。
　
<ITEM6>
 
摂取した259本の牛乳のうち約5%が殺菌後に低温細菌に汚染されていた。7.5℃で8,9,12,14保存後の牛乳のセレウス菌数は、E+2cfu/ml以下〜E+7cfu/mlであった(付図1)。ヒトが1回の試験で摂取したセレウス菌量はE+6cfu以下(症状あり5/132),E+6〜E+7cfu(症状あり2/32),E+7〜E+8cfu(症状あり2/26),E+8cfu以上(症状あり9/69)の4つに分類され、E+8cfu以上摂取した時に胃腸炎の症状を示した件数が有意に増加した(P≦0.1)。牛乳から分離したセレウス菌47株の下痢エンテロトキシンのA414による力価は患者分離株LWL3の300に対し、<10〜50であった。
　
<ITEM7>
 
Journal of Food Protection, 59, 723
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Journal of Food Protection, 59, 723

<LIST1>

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