文献番号：b-1
タイトル：<I>Bacillus cereus</I> spores in raw milk: Factors affecting the contamination of milk
　　　　　 during the grazing period
邦訳タイトル：原乳中の<I>Bacillus cereus</I>芽胞　放牧期間中の牛乳の汚染に影響を与える要因
著者：Christiansson A, Svensson B, Bertilsson J
誌名､発行年、巻号頁：Journal of  Dairy Research　（1999）, <B>82</B>, (2), 305-314
菌種：2.<I>Bacillus cereus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
乳汁中に含まれる<I>Bacillus　cereus</I>芽胞量に影響を与える潜在的汚染源と要因を調べる
　
<ITEM2> \n検体名
 
牛乳、飼料（牧草、干草、濃縮飼料、サイレージ）、糞、土、空気
　
<ITEM3>
 
土は4箇所の採取場所より採取、草は地上3cmではさみで切り取り採取、飼料は給餌中にコンポ飼料として採取、糞は各牛の直腸から採取、空気は搾乳中の牛乳房近辺の空気をエヤーサンプラーで採取、牛乳は自動サンプリング装置で採取した。
　
<ITEM4> \n検査検体数
 
-
　
<ITEM5>
 
6月から9月までの期間に、8頭の牛群を用い2週間の試験を3回、2年間行った。
1)微生物分析。土試料は前処理（70℃5分加熱）後の試料液を血液寒天プレートに塗布する。20℃で48時間培養する。典型的セレウスコロニーを計数する。乳試料は試料を72℃で5分加熱する。トリプシンとTriton-Xで処理する。メンブランフィルターに通す。フィルターを血液寒天ベースNo.2の表面で20℃で48時間培養(以上Christiansson既報に準ず)する。典型的セレウスコロニーを計数する。
2)RAPD-PCRを用いた遺伝子フィンガープリント。抽出DNAを RAPD-PCRのテンプレートに用い、サーマルサイクラーにてPCR反応。PCR産物を1.8%寒天ゲルで分離。クラスター分析はPCRフィンガープリントのデンシトメーター結果のピアソン相関係数に基づき実施した。
　
<ITEM6>
 
乳汁中の芽胞量は、乳頭の土による汚染具合に大きく関連していた。土の水分含量の多さ、水分蒸発の低さと汚れたアクセス通路が、高い芽胞濃度に関連する最も重要な要因であった。土の芽胞含量は、時期と採取場所により、<50から380000/gまで様々であった。搾乳機は汚染に大きな影響はなく、搾乳中の空気と飼料中の芽胞含量は少なく、汚染にとって重要ではなかった。糞便中の芽胞含量も低かった。土と牛乳からの分離株のB．CereusのPAPD-PCR法による遺伝子フィンガープリント比較で、主な汚染源は土壌であることが分かった。
　
<ITEM7>
 
Journal of Dairy Research, 82.305
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Journal of Dairy Research, 82.305

<LIST1>

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