文献番号：b-72
タイトル：6.3 serology and chraracterization of toxigenic <I>Bacillus cereus</I>
邦訳タイトル：毒素産生性セレウス菌の血清学と特徴付け
著者：K. Shinagawa
誌名､発行年、巻号頁：Bulletin of the International Dairy Federation, (1993), <B>(287)</B>, 42-49, 
菌種：2.<I>Bacillus cereus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
食中毒におけるセレウス菌の病原性、特に単離菌とその産生毒素の特徴付けを行う。
　
<ITEM2> \n検体名
 
・下痢性食中毒から単離したセレウス菌　・嘔吐性食中毒から単離したセレウス菌
　
<ITEM3>
 
-
　
 
<ITEM4> \n検査検体数
 
・下痢性食中毒から単離したセレウス菌7株　・嘔吐性食中毒から単離したセレウス菌73株
　
<ITEM5>
 
耐熱性：ポテトデキストロース培地で9-10日間培養したセレウス菌を、25℃、20min加熱処理して芽胞とし、その後100℃と105℃における耐熱性試験を行った。　
 
血清型：標準血清型菌を入手し、これらを抗原としてH1〜H24の抗血清を作製し、菌の分類に用いた。　
 
ファージ型：TS寒天プレートに塗末したセレウス菌に7種のファージをふりかけ、プラークのでき方で菌の分類を行った。　
 
エンテロトキシン：セレウス菌の培養上清より塩析、イオン交換クロマト、限外濾過、等電点クロマト、ゲル濾過、イムノクロマトの手法を用いてエンテロトキシンを精製した。エンテロトキシンのアッセイ法としてはウサギ、ベロ細胞を用いたバイオアッセイ法と逆受身ラテックス凝集法を用いた。
　
<ITEM6>
 
[要約]　嘔吐性食中毒から単離されたセレウス菌ででんぷんを加水分解できるものはなかった。これらの株から得た芽胞は熱耐性(105℃で5分)であった。嘔吐性食中毒での血清型はH-1、H-5とH-8であった。対照的に、下痢性食中毒から単離されたセレウス菌はでんぷんを加水分解し、その芽胞は熱耐性ではなかったし(100℃、30分)、血清型も一様ではなかった。単離菌の型判別の為に7種のファージが単離された。嘔吐性食中毒から単離された血清型H-1の株は6種のファージパターンに分類された。　　セレウス菌からエンテロトキシン(BCET)を物理化学的手法またはモノクロ抗体を用いたアフィニティークロマトで精製した。逆受身ラテックス凝集法(RPLA)では18時間以内で微量のBCET(1〜2μg/L)が検出された。下痢性食中毒から単離された株は1.6〜3.2mg/Lと高い濃度のBCETを産生していたが、嘔吐性食中毒から単離した株のほとんどはBCETを10μg/L以下しか産生しなかった。　　催吐性毒素は十分に特徴付けできなかった。高活性空胞化因子は米エキス培地とスキムミルクでの培養で産生された。吐瀉性食中毒から単離された株特に血清型H-1において、米エキス培地で培養すると20-160の高い液胞化因子が産生された。しかし下痢性食中毒から単離された株では液胞化因子は産生されなかった。部分精製して空胞化因子は安定で、様々な処理(加熱、pH変化、酵素処理)に耐性を示した。液胞化因子を30000-36000ユニット与えられたサルは3.5〜7時間以内に吐瀉した。それゆえ、液胞化因子は嘔吐性毒素そのものであると思われる。生乳中のセレウス菌検出頻度は高くはなかった。(4.8〜8.6%) 対称的に市販の脱脂粉乳では43.6%から104〜107個/L(または104〜107個/Kg)の範囲でセレウス菌が見つかった。　低温殺菌したミルクを培地として10,20,30℃におけるセレウス菌の増殖、凝固促進、毒素産生を検討した。20℃で培養すると､12-18hrでBCET 2〜8μg/L､24〜36hrで空胞化因子 4〜8ユニット産生された。
　
<ITEM7>
 
Bulletin of the International Dairy Federation, (287), 42
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Bulletin of the International Dairy Federation, (287), 42
