文献番号：b-58
タイトル：Development of a streptavidin-conjugated single-chain antibody that binds <I>Bacillus cereus</I> spores
邦訳タイトル：-
著者：KAI KOO
誌名､発行年、巻号頁：Applied And Environmental Microbiology, (1998), <B>64</B>, (7), 2497-2502
菌種：2.<I>Bacillus cereus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
セレウス菌芽胞と特異的に結合する複合ストレプトアビジン単鎖抗体の開発を行い、迅速かつ簡便なセレウス菌芽胞の検出手法を確立する。
　
<ITEM2> \n検体名
 
・無調整乳
・リン酸緩衝液(対照)
　
<ITEM3>
 
-
　
 
<ITEM4> \n検査検体数
 
-
　
<ITEM5>
 
・セレウス菌芽胞は、強化した普通寒天芽胞形成培地を用いて調製した。芽胞数の計測にはTrypticase soy agar (Difco)を用いた。
・抗体の作成は大腸菌を利用して行われ、単純な透析等の処理を施し、可溶性抗体とした。
・免疫磁気ビーズ法を利用し、4℃、1時間でセレウス菌芽胞を検出した。なお、試料は無調整殺菌乳とリン酸緩衝液中にセレウス菌芽胞を接種(5xE+4spore/ml)したものを使用した。
・対照として複合ストレプトアビジン単鎖抗体を結合させずに同様の実験を行った。
　
<ITEM6>
 
・作成された抗体は天然物と比較して遜色ない物であった。
・1度セレウス菌芽胞に結合した抗体はリン酸緩衝生理食塩水で3回洗浄を行っても殆ど離れることは無かった。
・無調整殺菌乳では37%のセレウス菌芽胞が検出できた。
・リン酸緩衝液では90%以上のセレウス菌芽胞が検出できた。
・両者の検出精度の違いは、乳中の乳脂肪分と可溶性タンパク質の影響によるためである。
・対照実験ではセレウス菌は検出されなかった。
・本手法では24時間以内にセレウス菌の検出が可能である。
・本実験で使用した、複合ストレプトアビジン単鎖抗体は工業的に大量生産が可能である。
　
<ITEM7>
 
Applied And Environmental Microbiology, 64, 2497
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Applied And Environmental Microbiology, 64, 2497
