文献番号：b-50
タイトル：Isolation and characterisation of <I>Bacillus cereus</I> from pasteurised milk
　　　　　 in household refrigerators in the Netherlands
邦訳タイトル：オランダ一般世帯冷蔵庫に保管された低温殺菌乳からのセレウス菌の単離と特徴付け
著者：M. C. Te Giffel  et. Al. 
誌名､発行年、巻号頁：International Journal of Food Microbiology, (1997), <B>34</B>, 307-318, 
菌種：2.<I>Bacillus cereus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
一般世帯で消費されている低温殺菌乳中のセレウス菌数と好熱菌数とを関連づけて調査する。
　
<ITEM2> \n検体名
 
低温殺菌低脂肪乳
　
<ITEM3>
 
サンプルサイズ　：　100mL　
採集方法　：　冷蔵庫のドアケースに収納された口が開封されたカルトンから牛乳を採取
　
<ITEM4> \n検査検体数
 
334
　
<ITEM5>
 
好熱菌数：原液および10倍希釈液0.1mLをPCAプレートに播き、30C、72hr培養してカウント。　
　
セレウス菌数：原液1mLまたは10倍希釈液0.1mLをMETDプレートに播き、30C、24hr培養後コロニーをカウント。　
　
糖代謝試験：API50 strip使用　増殖温度：BHI培地で増殖させたセレウス菌をTSAプレートに播7,10,15,20,25,30,37,42,50Cで1週間培養した。　
　
ヘモリシン産生：ヒツジ血球プレートにセレウス菌培養上清を30uL落とし、30Cで16-18hr培養。溶血円の半径を測定　
　
エンテロトキシン産生：セレウス菌の培養上清でウエスタンブロット法、PCR法、ベロ細胞毒性法で定量した。
　
<ITEM6>
 
[要約]　オランダの一般世帯の冷蔵庫に保管された低温殺菌乳中のセレウス菌汚染率を菌の性質について研究を行った。分析した334検体中247検体（74%）で好熱菌数が50〜5000個/mLであった。セレウス菌は133検体(40%)から単離できたが、一般的に菌数は低く、258検体(77%)で5個/mL以下であった。(分布は<I>B. cereus</I>殺菌乳で、<E+0.7:258, E+0.7-1.7:24, E+1.7-2.7:21, E+2.7-3.9:14,E+3.7-4.7:16, >E+4.7:1であった。)　　当初の予測通り好熱菌数とセレウス菌数は保管温度が高く保存期間が長いほど多くなった。
全体でセレウス菌と疑われる143コロニーが単離され、ISO確認テストと糖代謝パターンから134コロニー（94%）がセレウス菌と同定された。同定された134コロニーのうち20%がラクトース発酵を行い、増殖試験を行った106株の53%が7Cでの増殖が可能であった。これらの割合は乳製品以外から単離されたセレウス菌での割合に比較してかなり高率であることから、今回単離したセレウス菌株が牛乳保存条件に適応していることが示唆された。
106株でヘモリシン産生をテストして27%がヘモリシンBLの非連続溶血パターンの性質を現したことから、有毒要因となり得る。
エンテロトキシン産生をテストした37株ではウエスタンブロット法で27株（33%）、PCR法で28株（76%）、ベロ細胞法で26株(70%)にそれぞれ産生が認められた。
単離した菌のうちラクトースを資化できない株でのエンテロトキシン産生はラクトース資化できる株のそれに比べて低いものであった。
セレウス菌が原因となる牛乳（乳製品）での食中毒の報告は少ないが、今回の調査で単離されたセレウス菌株のほとんどがエンテロトキシン産生能を持つため、健康を害する危険性を孕む。
　
<ITEM7>
 
International Journal of Food Microbiology, 34, 307
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=International Journal of Food Microbiology, 34, 307
