文献番号：b-14
タイトル：Growth and toxin profile of <I>Bacillus cereus</I> isolated from different food source
邦訳タイトル：-
著者：Grethe I.
誌名､発行年、巻号頁：International Journal of Food Microbiology , (2001) , <B>69</B> , 237-246
菌種：2.<I>Bacillus cereus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
<I>B.cereus</I>のような耐冷性の微生物の生理的なメカニズムを知ることにより食品の保存方法等をデザインできるようにする。
　
<ITEM2> \n検体名
 
<I>B.cereus</I> NVH 2,3,38,44,45,68,74,87,141,0075-95,200。菌株の由来は8株が乳由来、3株が肉由来で内2株が食中毒株である。
　
<ITEM3>
 
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<ITEM4> \n検査検体数
 
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<ITEM5>
 
①PCRにより、各株の毒素遺伝子｛非溶血性エンテロトキシン（nheA,B,C,nhlA-nhlB,nhlB-nhlC)、溶血性エンテロトキシン（hblD-hblA)、エンテロトキシンT（becT)｝、及びコールドショックタンパク(cspA)を調べた。
②栄養細胞を初発菌数がE+5-E+6/mlになるように接種し、4,6,7℃で35日間振とう培養し、生育を見た。培地にはBHIとUHT殺菌乳を用いた。生育上限温度は、BHI培地を用いて静置培養によって調べた。
③栄養細胞E+5cfu/ml接種し、10℃40d、15℃35d、20℃5d、30℃で5d培養後マラカイトグリーン染色し、位相差顕微鏡によって芽胞形成率を調べた。80℃10分、加熱により。培地にはBHI寒天培地、BHI、UHT殺菌乳を用いて静置培養により行った。
④芽胞を4.7log10 cfu/mlになるように接種し、7,10℃で0,1,2,3,7,10日後の発芽率を調べた。芽胞液は菌を硫酸マグネシウム添加NA培地により30℃4d培養し、使用直前に80℃10分熱処理して作成した。培地にはBHIとUHT殺菌乳を用いた。
⑤Vero細胞タンパク合成阻害を見ることにより毒素産生性を調べた。タンパク合成阻害率50%以上を陽性とした。
　
<ITEM6>
 
①11株すべてがVero細胞に毒性を示した。また、nheをコードしていた。nheA,B,Cは全ての菌株で陽性であり、nheA-B,nheB-C,becTは10菌株が陽性であった。Hblは6菌株が陽性であった。
②11株中7株が7℃で成育し、2株が4℃、6℃で生育した。BHIブロス中でもUHT乳中でも世代時間はほぼ同等だったが4℃,6℃で生育した2株は、UHT乳とBHIの間で誘導期に差が出た（UHT乳：10d、BHI：7d）。増殖上限温度は、11株のうち、42℃11株、43℃10株、44℃9株、46℃9株、48℃3株、50℃1株という結果となった。また全ての菌株はcspAをコードしていなかったことから、<I>B.weihenstephanensis</I>ではなかった。
③NVH 68,74,141の芽胞形成はBHIブロス中より乳中の方が良好であり、30℃の方が20℃、15℃より早く芽胞を形成し、芽胞が形成されない株も30℃以下ではみられた。また、10℃ではBHI中では芽胞が全ての株で形成されないが、寒天培地であれば形成される株もあった。
④11株中、耐冷性の強い菌株が7℃においても10℃においても最も素早い発芽を示した（付図1）。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　
<ITEM7>
 
International Journal of Food Microbiology ,69,237
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=International Journal of Food Microbiology ,69,237

<LIST1>

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