文献番号：b-2
タイトル：Involvement of a pasteurizer in the contamination of milk by <I>Bacillus cereus</I>
　　　　　 in a commercial diary plant
邦訳タイトル：商業用乳加工工場における牛乳の<I>Bacillus　cereus</I>汚染への殺菌装置の関与
著者：Svensson B, Christiansson A, Eneroth A, Molin G, Brendehaug J
誌名､発行年、巻号頁：Journal of  Dairy Research （2000）,　<B>67</B>, (3), 455-460
菌種：2.<I>Bacillus cereus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
乳製品工場における殺菌乳へのセレウス菌の汚染に対して、殺菌装置がどのように関与しているかを古典的な微生物検出法と同時に多形DNAランダム増幅法及びポリメラーゼ連鎖反応（RAPD−PCR）を用いた菌株型別により検討する。
　
<ITEM2> \n検体名
 
殺菌乳製造ライン中のミルク
　
<ITEM3>
 
(A)サイロタンク(B)殺菌機の直前(C)殺菌機の直後(D)バッファータンク(E)充填機直前(F)牛乳容器でサンプル採取する。製造日中に渡り、各々1時間かけて4つのサンプリング・ランを実施した。
　
<ITEM4> \n検査検体数
 
-
　
<ITEM5>
 
1)未殺菌乳中のB.sereus胞子の分析。試料を72℃で5分加熱する。トリプシンとTriton-Xで処理する。メンブランフィルターに通す。フィルターを血液寒天ベースNo.2の表面で20℃で48時間培養する。
2)殺菌乳の分析。試料を7℃で7日間培養する。連続10倍希釈しその0.1mlを血液寒天に播き、20℃で48時間培養する。
3)RAPD-PCR。DNAは1コロニーから採取し活性炭とともに滅菌水に懸濁する。70℃で凍結。10分間煮沸し、遠心分離後の上清をRAPDの鋳型に使用する。RAPDパターンはPearsonの相関係数を用いて、GelCompar4.0でクラスター分析により解析した。同一のPCRパターンのクラスターはゲル片の視覚比較により確認した。
　
<ITEM6>
 
原乳中(サンプリングポイントAとB)の B.cereus胞子の初期濃度は比較的低く、終日低レベルにとどまった。殺菌後(C)の B.cereus含量は最初のサンプリング時間の間は低かったが、第2のサンプリング時間の間に増加した。分離菌は多様であり独特のRAPD様式を有していた。第2のサンプリング時の菌数の大幅な増加は、殺菌装置の不十分な洗浄が原因で、殺菌に耐えたセレウス菌胞子が殺菌装置に付着し牛乳を汚染させた。乳製品の汚染源を追跡するのにRAPD型分けは有用であった。
　
<ITEM7>
 
Journal of Dairy Research, 67, 455
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Journal of Dairy Research, 67, 455

<LIST1>

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