文献番号:B-9-2
タイトル：鶏卵輸送用再生紙トレイに付着したSalmonellaの生存性の検討と消毒の試み
筆頭著者：市川雅子
論文，年，Vol，頁（～）：鶏病研究会報, 1999, 35, 144-150
調査地　：流通・問屋・販売
 
<ITEM1> \n調査の目的
 
鶏卵出荷時に使用される再生紙トレイに付着したサルモネラの生存性についての検討並びにホルマリン燻蒸と乾熱による消毒の可能性について検討した。
予備試験として再生トレイに付着したサルモネラを高率に検出できる培養方法を検討したところ、卵黄添加菌液（S．Infantis、S．Enteritidis）は24時間後でも検出可能であり、以下の実験を行った。卵黄添加SI菌液を再生紙トレイ上に滴下し菌の生存確認試験を行ったところ28日目でも生存確認。
消毒試験として、43段重ねの再生紙トレイを用いてホルマリン燻蒸及び乾熱試験したところ、ホルマリン燻蒸では効果なし、乾熱では100℃、3時間で効果を認めた。
 
<ITEM2> \n検体名
 
 
<ITEM3>
 
供試菌株：Salmonella　Infantis（鶏舎床面スワブから分離）、Salmonella　Enteritidis（ひなの輸送箱敷料から分離）　
 
試験用再生紙トレイ：市販トレイを半切し20穴中12穴卵座底部に各種菌液を滴下した。
 
培養菌液：ブイヨンのみ、ブイヨン＋添加材料（寒天0．05％及び0．15％、ゼラチン1％及び2％、Tween80　2％及び5％、卵黄50％、卵白50％）　　　　　　　　　　　　　　　　　　						
 
<ITEM4>
 
サルモネラ						
 
<ITEM5>
 
（1）サルモネラ生存性試験
②菌液のスライドグラス塗抹による試験： (ｱ)ブイヨンに添加材料として、寒天0．05及び0．15％を各3検体、ゼラチン　1及び2％を各2検体、TWeen80　2及び5％を各2検体をそれぞれ混合→120℃15分滅菌→SI接種→37℃、18h培養。　(ｲ)ブイヨンで37℃、18h培養した菌液に無菌的に卵黄及び卵白を50％加え混合したもの各2検体。(ｳ)ブイヨンのみで培養したもの3検体。以上の調整菌液各々0．01mlずつ滅菌スライドグラスに塗抹したものをシャーレーに入れ→37℃、1，2，3，24h静置後→各時間毎に滅菌生理食塩水で湿らせた滅菌綿棒で拭き取り滅菌生理食塩水1ml中で撹拌した10倍段階希釈とし1000倍まで希釈。→希釈液をDHL培地に0．05mlずつ塗抹（37℃、18h培養）　→コロニー数確認。また、すべての検体について残りの検液0．85mlに滅菌ブイヨン10mlを加え37℃、18h増菌培養→DHLに塗抹し菌の発育を確認した。
 
<ITEM6>
 
（1）の②　ブイヨン培養では3時間目にはすべて検出限界以下、発育なし。寒天＋ブイヨン培養でも24h後に検出限界以下、1／3検体で発育確認。ゼラチン添加でもほぼ同様な結果。Tween80では3時間目にはすべて検出限界以下、発育なし。ブイヨン培養＋卵黄50％添加では1／2検体で24h後に発育確認。卵白50％添加では3時間目に検出限界以下。
S．Eをブイヨン培養＋卵黄50％添加でもSI同様の結果となった。
従って、以下の試供菌液調整はブイヨン培養菌液に卵黄50％添加液を使用した。
 