文献番号:D-81
タイトル：リングカラー実験方法を用いた異なったサルモネラ血清型の卵殻浸透傾向
筆頭著者：T．JAVED
論文，年，Vol，頁（～）：Acta Microbioligica Polonica, 1994, 43, 67-72
調査地：GPセンター
 
<ITEM1> \n調査の目的
 
卵殻に対するサルモネラ菌の浸透程度の調査
 
<ITEM2> \n検体名
 
卵
200個
 
<ITEM3>
 
 
 
 
<ITEM4>
 
サルモネラ
 
<ITEM5>
 
卵殻膜を通して浸透するサルモネラの程度を調べることについては200個の卵を能動浸透領域の検出のために赤（エリスロシン，FD＆C　Red　No.3）と緑（ファーストグリーンFCF，FD＆C　green　No．3）の水溶性食用色素溶液に浸した。滅菌水で洗浄する前に卵を3分間赤い溶液，それから6分間緑の溶液に浸した。200から180の間の卵を微生物浸透研究のために選択し，そしてそれぞれの卵の上に直径1cmの5つのスポットをつけた。
殺菌したスチールシリンダー（直径及び高さ1cm）をスポットをつけたまわりの卵殻に無菌状態の下で融けたパラフィンで外部との境界線にシールを付与した。
このシリンダーはサルモネラのテスト品種で満たされ，筒の側面はパラフィルム（American　Can　Campany，Greenwith，CT，USA）でシールし，卵を18時間増菌した。
卵を無菌状態で開け明確な浸透を確証する卵殻膜の上に着色したスポットから浸透したサルモネラの分離を試みた。
全ての浸透したと思われた場所はセレナイト培地で増菌した白金線で接種し，MacConkey培地や培地に画線培養し，第一段階の生化学的な反応を調べるために典型的なサルモネラが疑われるような透明な滴状コロニーをTSI培地に接種した。
グルコース（＋），ラクトース（-），シュークロース（-）でのH2Sやガス産生をともなった発酵はサルモネラとして推測した。
分離されたサルモネラの典型的な生化学的特徴はインドール，H2S，NH4，ブドウ糖，クエン酸アンモニウム，硝酸カリウム，VPテスト，メチルレッド，尿素，クエン酸，mucate，酒石酸塩，青酸テストを使用して詳細に調査した。糖発酵テストはadonitol ，dulcitol，sorbitol，アラビノース，キシロース，ラムノース，マルトース，イノシトール、乳糖、ショ糖、 mannitol 、ブドウ糖とガラクトースを含んでテストされた。
サルモネラの典型的な生化学的な反応をする分離株を確認しサルモネラリファレンス研究所（Cantacusino研究所，ブカレスト，ルーマニア）から得た標準サルモネラO混合と群別血清を使って血清学的に型別をしました。O血清反応のスライド凝集反応によりO群別を確定した分離株は，H抗血清を使って試験管凝集反応によりより以上の確定をしました。
（カフマンが1966年，ミューレイが1986年に行った方法による）
データが内部処理と外部処理で異なって分析された。
特徴的な違いは，ANOVAとDunnetの二重盲検試験による単一変化とマルチ変化の間は危険率P＜0．01から危険率P＜0．05のレベルで分析された。
（Javedら）
 
<ITEM6>
 
卵殻膜を通して浸透するサルモネラ属菌の程度を調べることについては200個の卵を能動浸透領域の検出のために赤と緑の水溶性食用色素溶液に浸した。
これらの色は卵殻における微小口の検出のためにマーカーとして使用しました。
高度に意味の有るグリーンのスポットは，3分間暴露後のA3分間の暴露後，グループAの赤いスポットと比較するような高度に重要な緑のスポットが分光光度計で検出された。
着色された溶液に長い暴露はもっと深く卵の構造の中まで浸透するより高い傾向を示した。
3分間の暴露後広がった染色した場所は，6分間暴露した後の広がったすべての場所を比べると病原体のより重要なポイントである。
卵の表面は浸透部位のもっともそれらしいところを反映していた。
その方法は，微生物侵入の可能性確認のために非微生物学的マーカーとしてよい。
図1に示すように，19のサルモネラ属菌の浸透パターンを卵の外部構造を通して試験をした。
合計180の卵（900ポイント）を使って最大限（30％）の浸透はエリアⅢだった。
そしてそこはサルモネラ属菌が卵殻，卵膜をとおしてエリアⅡ（14.77%)とエリアⅠ（4.6％）に続く。
卵の中身へのサルモネラ属菌の浸透が最大限であったであったことは十分明白であった。一方，エリアⅡへの浸透は外の卵殻膜にそして殻皮と殻を通ってまれなケースであった。
エリアⅠやエリアⅡへの浸透は意味のあるものではないが，一方エリアⅢでの高い割合（30％）の浸透はより大変意味がある。
運動性のあるサルモネラ属菌は，S．typhimuriumやS．hadarのようにより殻を通して深く卵中身に入りこみやすくエリアⅢに28％入りこむ。
その他の運動性のある血清型菌では，S．readingが22％卵殻を通してエリアⅢに浸透した。同じようにS．anatum(20%),S.neroとS．agona(18%),S.chesterとS．mission（16％），S．heidelberg(14%)運動性のないサルモネラ属菌はエリアⅠ，Ⅱ，Ⅲを浸透は少ない，それはS．gallinarumとS．pullorumはたった2パーセントの溶け込み強度に過ぎない。
浸透の可変性が見られたのは，S．orionでそれは運動性があるが，浸透性にとぼしい。
 
<ITEM7>
 
Acta Microbioligica Polonica, 43, 67
 
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Acta Microbioligica Polonica, 43, 67
