文献番号：s-44
タイトル：A novel ELISA format for the rapid and sensitive detection of Staphylococcal
　　　　　Enterotoxin A
邦訳タイトル：-
著者：Giletto A.
誌名､発行年、巻号頁：Bioscience Biotechnology and Biochemistry, (1998), <B>62</B>, (11), 2217-2222
菌種：1.<I>Staphylococcus aureus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
 
　
<ITEM2> \n検体名
 
 
　
<ITEM3>
 
10gのハム、チェダーチーズ、生鶏肉および豆もやしに10ngのエンテロトキシンAを注入。室温1hr後に、等量のPBSでブレンダーにかけ、4000rpmで遠心後、上清をSEAテストに使用。
　
<ITEM4> \n検査検体数
 
 
　
<ITEM5>
 
1) 抗体ビーズの作成：φ30〜60μmのポリスチレンビーズに吸着させる。0.1Mホウ酸ナトリウム(pH8.5)と抗SE  IgG抗体を加え、室温で一晩振とうして、抗体をビーズに吸着させる。
2) キャピラリーカラムの作成：ガラス管に抗SE IgG抗体コートビーズを詰め、上下を羊IgG抗体でコートしたビーズでｻﾝﾄﾞし、外側を綿栓でふさぐ。
3) 検出方法：ELISA法と同様。サンプルのカラム吸着および2次抗体反応は室温で2分。長期保存の場合は水洗後にアセトンでリンスすることで、5ヶ月間は退色しない。発色ｼｸﾞﾅﾙはｽｷｬﾅｰで取り込み、0〜225で数値化。
　
<ITEM6>
 
1) 検査速度：10分以下で肉眼による検出が可能。
2) 検出限界：SEAをPBSに溶かして供試。発色基質により感度は異なる。ME/DABの場合は2pg、TMBの場合は6pgのSEAを検出可能。
3) 食品での検出：ハム、生鶏肉、チーズにSEAを注入し、等量のPBSでブレンダーにかけ上清を供試。食品1gあたり1ngのSEAを検出可能。
4) 他の検査法との比較：MPC ELISAはTECRAやSET-RPLAよりも検出感度が高く、疑陽性も見られない。また、カラム1本内でポジティブコントロールとネガティブコントロールのを両方の検出を行うことも可能。
　
<ITEM7>
 
Bioscience Biotechnology and Biochemistry, 62, 11, 2217
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Bioscience Biotechnology and Biochemistry, 62, 11, 2217
