文献番号：s-2
タイトル：Assessing and analysing contamination of a dairy products processing plant
　　　　　by <I>Staphylococcus</I> aureus using antibiotic resistance and PFGE
邦訳タイトル：乳製品製造工場の<I>Staphylococcus</I>　aureusによる汚染に関して抗生物質耐性法
　　　　　　　およびPFGE法を用いる評価及び解析
著者：Tondo E C, Guimaraes M C, Henriques J A P, Ayub M A Z
誌名､発行年、巻号頁：Canadian journal of microbiology　（2000）, <B>46</B>, (12), 1108-1114，
菌種：1.<I>Staphylococcus aureus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
乳製品製造工場の<I>S.aureus</I>による汚染を調査すること、及びASTおよびPFGE分析によって分離株と汚染源との関係を調べることを目的とする。
　
<ITEM2> \n検体名
 
1997.5〜1999.11の2.5年間、Nova Petropolisの中規模乳製品工場の従業員より51、原料乳21、機械装置より145、最終製品3200のサンプル。
　
<ITEM3>
 
機械装置表面試料：0.1%ペプトン水で湿らせた綿棒ふき取りで100cm2から採取した。食品取扱い従業員：Adesiyunらに従い鼻通過物を綿棒ふき取った。原料乳：配送トラックより100mlづつ採取した。製品：FDA法に従い10g or mlを採取した。
　
<ITEM4> \n検査検体数
 
 
　
<ITEM5>
 
1）菌株の同定。B.P.プレートに生育したコロニーを、グラム染色、コアグラーゼ、カタラーゼおよびDNAseの産生、マニトールの酸化性、発酵性より同定した。
2)AST(抗生物質感受性試験)。使用抗生物質は、ペニシリン、エリスロマイシン、オキザシリン、セファロチン、クリンダマイシン、ゲンタマイシン、スルフアメトキサゾール／トリメトブリム、バンコマイシン。耐性有を1、中間耐性有を2、感受性有を3として数値化した。
3)PFGE（パルスフィールドゲル電気泳動）試験。染色体DNAの調製および制限酵素分解の方法はSennaらの報告に従う。高分子量制限フラグメントはPFGAで分析した。バンドパターンはMolecular Analyst Fingerprinting　softwarシステムで比較し、UPGMA法を用いて遺伝子系統樹を作成した。
　
<ITEM6>
 
1）汚染状況。従業員では51名中19名（35.2％）から <I>Staphylococcus</I>　aureusが分離された。原料乳では21台の配送トラック中19台（90.4％）が <I>S.aureus</I>に汚染されていた。(平均3.5×103CFU/ml)。装置表面からは <I>S.aureus</I>は検出されなかった。最終製品では3200サンプル中10サンプルにのみ<I>S.aureus</I>が検出（ソフトチーズ　4、チェダーチーズ　1、バター　2、殺菌乳（平均6.1x10CFU/g or ml）。最終製品の主たる汚染源は原料乳の汚染によることが示唆された。
2）抗生物質感受性によるタイプ分け。従業員、原料乳、採集製品から分離されたアウレウスの内各々94.4%,、47.3%、50%がペニシリン耐性であった。ASTによりAからHの8つの異なったプロフィールになる。ASTからは類似の<I>S.aureus</I>が従業員、原料乳、製品に住み着いているため、汚染源を同定できない。
3)PFGE分析によるタイプ分け。PFGE遺伝子型分析でDNAパターンは6から15の明白なバンドを示した。従業員、原料乳、製品から分離した48の <I>S.aureus</I>株から42の異なったDNAバンドパターンが検出され本菌の加工工場中における高度な多様性を示した。PFGE法の識別力はASTより優れており、乳工場でのバクテリアの調査に有効な手法である。
　
<ITEM7>
 
Canadian journal of microbiology　46, 1108
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Canadian journal of microbiology 46, 1108

<LIST1>

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