文献番号：s-27
タイトル：Behaviour of <I>Staphylococcus aureus</I> in demi‐hard cheese made from raw milk
　　　　　 with nisin‐producing starter cultures
邦訳タイトル：ナイシン生産スターターカルチャにより原乳から製造した半硬質チーズにおける黄色ブドウ球菌の挙動
著者：RODRIGUEZ E, ARQUES J L, GAYA P, TOMILLO J, NUNEZ M, MEDINA M
誌名､発行年、巻号頁：Milchwissenschaft　(2000),  <B>55</B>, (11), 633‐635 
菌種：1.<I>Staphylococcus aureus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
2種のナイシン産生乳酸菌スターターカルチャーが、生乳からのセミハードチーズの製造・熟成中の<I>S.aureus</I>生残性に及ぼす影響を調べる。
　
<ITEM2> \n検体名
 
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<ITEM3>
 
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<ITEM4> \n検査検体数
 
 
　
<ITEM5>
 
1)菌株と培養条件。<I>L.lactis</I> subsp. Lactis TAB 50(ナイシン産生株)は生乳より分離した。<I>L.lactis</I> subsp. Lactis TAB 50-M4(ナイシン産生株（UV照射で得られた変異株(Lac-,Prt-)）)。MRSブロス中で30℃18時間増殖させ、チーズ製造前に滅菌還元脱脂乳で30℃で16時間植え継いだ。2）市販乳酸菌スタータは中温性のLD-type CH-01。チーズ製造前に2回、滅菌還元脱脂乳で30℃16時間植え継いだ。<I>S.aureus</I>　CECT4013はチーズ製造前に2回、Triptic Soyブロスで30℃で18時間植え継いだ。
2)チーズの製造。生乳に<I>S.aureus</I>を105/ml接種し4つに分けた。①スターター接種せず（コントロール）。②1% <I>L.lactis</I> TAB50。③1% <I>L.lactis</I> TAB50-M4。④1%　市販スターター CH-N01。この乳を用いチーズ製造した。
3) 微生物分析。チーズ試料は、製造後8時間、1日、7日、30日、60日後に滅菌Na citrate溶液中でホモゲナイズし、それを滅菌ペプトン水で10倍希釈した。<I>S.aureus</I>菌数は、Baird-Parker寒天平板で37℃48時間培養しSpiralシステムで測定した。　　　・全生菌数はTS寒天平板で30℃で72時間培養し測定した。
4)バクテリオシン活性の検出。チーズ試料5gを20mlの滅菌0.02N HClにて、70℃でホモゲナイズした。20000xgで15分4℃で遠心分離後、その上清をエッペンドルフチューブ中、-40℃で凍結した。各上清25μlづつを、カタラーゼ（150IU/ml）とインジケーターとしての0.1％Lb.buchneri St2A　16時間培養物を含むAPT寒天pour平板の3連ウエルに入れる。37℃で一夜培養後にバクテリオシン活性は阻害ゾーンの直径で表す。
　
<ITEM6>
 
ナイシン産生株の<I>L.lactis</I> subsp.<I>lactis</I> TAB 50及びそのLac-,Prt-突然変異株TAB 50‐M4は、製造及び熟成中におけるﾁｰｽﾞ中の黄色ﾌﾞﾄﾞｳ球菌の増殖を低下させた。市販スターターも黄色ﾌﾞﾄﾞｳ球菌の増殖を低下させたが、ナイシン産生株より低下度は小さい。ただし60日後にはナイシン株と変わらなくなった。ナイシン産生カルチャーを接種した乳から製造したチーズでは、バクテリオシン活性が熟成期間を通じて検出された。ナイシン産生株<I>L.lactis</I> subsp.<I>lactis</I> TAB 50及びその突然変異株TAB 50‐M4は、もし黄色ﾌﾞﾄﾞｳ球菌による最終汚染を防御するならば、生乳もしくは殺菌乳からのチーズ製造の、スターターカルチャーあるいは補助スターターとして使える。
　
<ITEM7>
 
Milchwissenschaft, 55, 633
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Milchwissenschaft, 55, 633

<LIST1>

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