文献番号：sj-15
タイトル：Bactericidal activity of probiotic culture on food‐borne pathogens in vitro
邦訳タイトル：乳酸菌培養液の食中毒病原菌に対する殺菌作用
著者：清水健介, 野本康二
誌名､発行年、巻号頁：ﾔｸﾙﾄ研究所研究報告集 (2000)　<B>NO.20</B> 1‐10 
菌種：1.<I>Staphylococcus aureus</I>
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
<I>L.casei</I>シロタ株、<I>B.breve</I>ヤクルト株の培養菌液中に食中毒病原菌3菌種あるいは非病原性大腸菌を添加し、異なる温度に一定時間保持した後の病原菌の生残数を経時的に求める。
　
<ITEM2> \n検体名
 
乳酸桿菌として<I>L.casei</I>シロタ株、<I>B.breve</I>ヤクルト株を使用。対象菌は、(<I>S.typhimurium</I> LT-2、<I>S.aureus</I> YIT 6075、腸管出血性大腸菌O-157:H7 89020087)あるいは非病原性大腸菌<I>E.coli</I> YIT6044(ATCC11775)の4菌株を使用した。
　
<ITEM3>
 
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<ITEM4> \n検査検体数
 
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<ITEM5>
 
1)各菌の培養培地。シロタ株はLactobacillusMRSブロス、<I>B.breve</I>ヤクルト株は1％グルコース加GAMブロス、腸管出血性大腸菌はCAYA液体培地、その他の3菌種は0.2％グルコース加ブレインハートインフージョンブロス。
2)培養菌液中の有機酸分析。各培養液を12,500g,4℃,10分間遠心分離し、その上清を10％過塩素酸水溶液と9:1の割合で混合し、4℃一夜反応させ、4℃で12,500g、10分間遠心分離する。その上清を0.45μmフィルターでろ過したものをサンプルとし液体クロマトグラフィーで分析した。
3)菌数測定培地。サルモネラ菌はHIT寒天培地、黄色ブドウ球菌はブドウ球菌寒天培地、腸管出血性大腸菌はCT-ソルビトール添加マッコンキーⅡ寒天培地、非病原性大腸菌はDHL寒天培地、シロタ株はLLV寒天培地、ヤクルト株はTYL寒天培地を使用した。
4)生残菌数測定。ｼロタ株あるいはヤクルト株の培養菌液3mlに1.0xE+8cfu/mlに調整した対象菌液を30μlづつ添加する。各温度にて1、3、6時間保存後の菌数を経時的に各選択培地で測定した。
　
<ITEM6>
 
シロタ株培養菌液中の平均菌数は2.5xE+9cfu/ml,pH4.1±0.2、ヤクルト株は2.0xE+9cfu/ml,pH4.4±0.1。サルモネラ菌に対する殺菌作用。シロタ株培養菌液中では、37℃では1時間以内に検出限界未満まで減少した。20℃では殺菌速度は遅かったが、6時間後には検出限度未満に減少した。4℃では殺菌効果は認められなかった。ヤクルト菌培養菌液中では37℃保存時にのみ強い殺菌活性が認められた。黄色ブドウ球菌に対する殺菌作用。シロタ株培養菌液中では4から37℃の保存温度でいずれも急速に死滅した。ヤクルト株培養菌液中でも同様の傾向を示した。腸管出血性大腸菌に対する殺菌作用　シロタ株培養菌液中では、37℃では1時間以内に検出限界未満まで減少した。20℃では殺菌速度は遅かったが、6時間後には初発菌数の1/1000に減少した。4℃では殺菌効果は認められなかった。ヤクルト菌培養菌液中では37℃保存時にのみ強い殺菌活性が認められた。非病原性大腸菌に対する殺菌作用　両菌株の培養菌液中とも、腸管出血性大腸菌に対するのと似た殺菌作用が認められた。シロタ株の20℃保存では、腸管出血性大腸菌に対するより強い傾向が認められた。シロタ株の殺菌作用がヤクルト株のそれより強力であったことは、培養菌液中の非解離有機酸の濃度の差および代謝活性の差に起因するものと考えられた。
　
<LIST1>

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