文献番号：357
タイトル：Malate and glucose in milk incubated with psychrotrophic bacteria
著者：P. Matias
論文-年：International Journal of Food Microbiology 23:215-219 (1994)
個票分類：検査方法の比較
調査国：スペイン

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査目的\n　
　
低温菌の生乳および加熱処理乳中における代謝活性を、それに含まれるリンゴ酸とブドウ糖の減少を指標にすることで調査した。
 
<ITEM2> \n検体名\nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
生乳：マドリッド近郊の農場より収集。
加熱処理乳：上記生乳を100℃10分間加熱して得られる。
乳腺炎牛の細胞：乳腺炎牛の牛乳を採取→600g、15分で遠心分離→沈殿物を使用
 
<ITEM3> \n調査対象微生物\n　
　
<I>Pseudomonas fluorescens</I> NCDO 2085
 
<ITEM4> \n検査方法\n増菌の有無\n培地\n　
　
培養：<I>Pseudomonas fluorescens</I>をTripticase-Soy Broth(TSB)(Oxoid)で24℃、24時間培養→5000g、10分間遠心分離→50mM、pH7.0のBES Buffer(Sigma Chemical)で洗浄→250mlの検体（生乳等）に10E4cfu/mlになるように接種→ロータリーインキュベーター（95rpm)内で7℃、72時間培養　　
微生物検査：上記方法で培養後、Milk Agar(Oxoid)に塗末→7℃、10日間培養
生化学検査（リンゴ酸、ブドウ糖それぞれ別個に行う）：検体（培養後の乳等）と同体積の1N過塩素酸を加える→7000rpm、15分間遠心分離→上澄みを２N水酸化カリウムでpH10〜11に調整→4℃、30分放置→ろ紙で結晶を除き、1N塩酸でpH7.5〜8に調整→Boehringer enzymatic kits ref.139068 and 124028(Boehringer Mannheim Biochemica)にて定量
 
<ITEM5> \n結果\n汚染実態\n汚染菌の性状\n防除対策等\n　
　
生乳、加熱処理乳共にブドウ糖の顕著な減少は低温菌が10E6cfu/mlに達したときに起こった。L-リンゴ酸の減少は低温菌が10E5cfu/mlに達するあたりで起こったが、乳腺炎牛の牛乳から採取した細胞を同系に8×10E5〜9×10E6cells/ml加えた系ではL-リンゴ酸の減少はほとんど見られなかった。
低温保管された牛乳中のブドウ糖濃度は低温菌が10E6cfu/mlを超えつつあるという指標にしかならず、実際消費される牛乳の品質を評価するには大きな意義はない。L-リンゴ酸濃度は、保管前の低温菌数が10E5以下であれば、低温菌が10E5〜10E7cfu/mlで増殖中であることを示す指標になりえる。
 

