文献番号：332
タイトル：Survival of Poliovirus in New Zealand Green-Lipped Mussels, <I>Perna canaliculus</I>, on Refrigerated and Frozen Storage
著者：Gail E. Greening
論文-年：Journal of Food Protection, 64: 881-884 (2001)
個票分類：総説
調査国：ニュージーランド

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n要約\n　
　
生鮮及び冷凍貯蔵されたイガイ（貝の一種）中のポリオウイルスの残存について、ウイルス培養法と分子法の両方を用いて評価した。
濾過済みの海水にポリオウイルス2(PV2)ワクチンを摂取し、生鮮のニュージーランド産パーナ貝（モエギイガイ）を入れ、好気条件、20℃で一晩培養を行った。
ウイルスの感染能力を保持する抽出、濃縮の方法は、培養終了直後、培養後4℃で2日間貯蔵後、そして−20℃で7日間、14日間、および28日間貯蔵後のイガイによって吸収されたPV2を回収するのに使用された。この方法によりウイルス培養と分子分析の両方が可能になった。
イガイの各試験区における、損傷のないPV2の存在は、エンテロウイルス属ウイルスに特異的な RT-PCR法により測定され、ドットブロット・ハイブリダイゼーションで確認された。
感染性のPV2の生存は単層プラーク法で測定された。
4℃で48時間貯蔵後の、感染性のPV2レベルは保存前のイガイから検出されたレベルの81%だった。また、−20℃で7、14、28日貯蔵した結果では、それぞれ、66％、53％、44％まで減少した。一般的なRT-PCR法は、ウイルス培養法よりウイルスの検出については10倍以上高感度だったが、ウイルスの感染力についての知見は得られなかった。
冷凍及び冷蔵の貝類中における伝染性病原ウイルスの存在は、健康被害の原因となり、公衆衛生上問題である事が示唆された。
 
<ITEM2> \n検体名\nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
活パーナ貝（モエギイガイ）：殻長約10cmのものを市場で入手。
いずれも70%アルコールで消毒後、6個：0タイムのウィルスフリー試験区とした。
残り30個は殺菌海水で洗浄し、15lの容器に6*10^3PFU/mlのPV2を接種し、20℃にて放置した。
 
<ITEM3> \n調査対象微生物\n　
　
Sabin poliovirus type 2 LSc ab(PV2)
ファイザー単味ワクチン
 
<ITEM4> \n検査方法\n増菌の有無\n培地\n　
　
単層プラーク法；
 BGM（Buffalo Green Monkey）細胞を培養→PV2株を希釈・調製→細胞培養
分子分析法；
 RNA抽出（チオシアン酸グアニジン−ケイ素抽出法）→蒸留水で溶出→抽出RNAをRT分析
 
<ITEM5> \n結果\n汚染実態\n汚染菌の性状\n防除対策等\n　
　
ウィルス感染力を保持する抽出・濃縮方法をパーナ貝によるPV2の回収を利用し、培養法及び分子分析法の両方にて検討を行った。この結果、各群のパーナ貝から損傷のないPV2の存在がRT-PCR法により測定し、ドットブロット法により確認を行った。また感染性のPV2の生存は単層プラーク法により測定した。
4℃で48保存後、貝中のPV2のレベルは保存前の81%が残存していた。また、-20℃で7,14及び28日間貯蔵した結果では、それぞれ66%,53%及び44%にそれぞれ減少した。
一般的なRT-PCR法は細胞培養法と比べて10倍以上高感度であったが、ウィルス伝染力については知見は得られなかった。
冷凍及び冷蔵の貝類中における伝染性病原ウィルスの存在は、健康被害の原因となり公衆衛生上問題であることが示唆された。
 
<ITEM6> \n項目と要旨
 
項目：冷凍及び冷蔵の貝類中における伝染性病原ウイルスの存在　

要旨：感染性のポリオウイルス2(PV2)レベルは−20℃で7、14、28日貯蔵した結果では、保存前のイガイから検出されたレベルに対して、それぞれ、66％、53％、44％まで減少したが、健康被害の原因となり、公衆衛生上問題である事が示唆された。
 
