文献番号：359
タイトル：Isolation of Mycobacteria from Frozen Fish Destined for Human Consumption
著者：M.J. Mediel
論文-年：Applied and Environmental Microbiology 66:3637-3638 (2000)
個票分類：原料における微生物汚染－①魚介類の汚染状況

調査国：スペイン

v※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査目的\n　
　
非結核性抗酸菌（NTM）が一般的に流通され消費されている冷凍の魚介類に存在し、それが人体内へ取り込まれる可能性があるかを調査した。
 
<ITEM2> \n検体名\nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
舌平目（<I>Solea solea</I>）：デンマーク産
メルルーサ(<I>Merluccius merluccius</I>)：スペイン産
鱈(<I>Gadus morhua</I>)：アイスランド産
リング(<I>Genypterus blacodes</I>)：アルゼンチン産
あんこう(<I>Lophius piscatorius</I>)：アイルランド産
 
問屋の冷凍庫(-18～-22℃)から包装済みの上記小売用魚介類（内臓は除去済）を使用まで冷凍状態で入手。各10検体。
 
<ITEM3> \n調査対象微生物\n　
　
Nontuberculous mycobacteria (NTM)
<I>Mycobacterium terrae</I> complex, <I>M. peregrinum, M.nonchromogenicum, M.gordonae</I>,
 <I>M. chelonae, M. avium</I> complex
 
<ITEM4> \n検査方法\n増菌の有無\n培地\n　
　
検体を4℃、24時間解凍→ドリップ(以下DW)と魚の身（以下SS)をそれぞれ採取
25gのSSをトリプトン培地で10倍希釈し、マスティケーター(IUL)で90秒間ホモゲナイズ→25mlを無菌のガーゼで濾過
DWおよび上記処理を行ったSSを2400g、20分間遠心分離→沈殿をラウリル硫酸ナトリウム法で除去→レーヴェンシュタイン-ジェンセン培地(Biomerieux)に塗末→4,25,37,45℃で2ヶ月間培養（確認は1週間毎）→チール-ニールセン染色法で抗酸菌の判定→Kent and Kubica手法(Ref.12)およびACCUPROBE system(Gen-Probe)を用いてハイブリダイゼーションを行い、NTMを同定
 
<ITEM5> \n結果\n汚染実態\n汚染菌の性状\n防除対策等\n　
　
DWおよびSSを合わせた100検体中29検体からNTMが分離された（舌平目 1, メルルーサ 1, 鱈 8,リング 9,あんこう 10)。 うちDWが19検体、SSが10検体であった。
29検体中、4℃での増菌で陽性のコロニーが得られたものは1検体、25℃では28検体、37℃では3検体、45℃では0検体であった。
NTMは食物摂取によっても人に伝染する。その媒体として過去畜肉、牛乳、野菜・果実類、ジャムや海水などからも分離され、その感染性が示唆されている。今回、冷凍魚介類を介してマイコバクテリアを摂取してしまう可能性がこの調査で確かめられた。
 

