文献番号：361
タイトル：Collaborative Evaluation of Two Methiods for the Detection of <I>Shigella sonnei</I> in Oysters and Young Corn
著者：Michiko, Miyahara.
論文-年：Biocontrol Science 8(4):177-182 (2003)
個票分類：検査方法の比較
調査国：日本

※このＣＤ-ＲＯＭでは、べき乗を右記の例のように表します。（例）10の9乗 → 10E9

<ITEM1> \n調査目的\n　
　
２００１年１０月と１２月に赤痢菌感染が西日本で発生し、原因は輸入の牡蠣であることがわかった。発生期間中標準的な赤痢菌の検出手法がなかったため、さまざまな方法が用いられた。そこで新たに、BAM/AOAC法に２段階の前処理強化を施した検出手法を２１の研究機関が共同となって試みた。
 
<ITEM2> \n検体名\nサンプルサイズ\n及び採集方法\n　
　
検体：①牡蠣　冷蔵と冷凍でそれぞれ２５gに対し１４個、１４０個の赤痢菌を接種したサンプル　②ヤングコーン　冷蔵と冷凍でそれぞれ２５gに対し１８個、１８０個の赤痢菌を接種したサンプル
 
<ITEM3> \n調査対象微生物\n　
　
赤痢菌（<I>Shigella sonnei</I>）
 
<ITEM4> \n検査方法\n増菌の有無\n培地\n　
　
新手法：サンプルをペプトン緩衝液による抽出にかけて好気的に培養した後にノボビオシンを含む赤痢菌培地に植えて嫌気培養して、PCR（プライマーセット２種：<I>inv</I>Eと<I>ipa</I>H）または３種（SS、CRT、DHL）の平板培地にまく。　　従来法（BAM/AOAC法）：サンプルをノボビオシンを含む赤痢菌培地に抽出したのち嫌気培養して、PCR（プライマーセット２種：invEとipaH）または３種（SS、CRT、DHL）の平板培地にまく。
 
<ITEM5> \n結果\n汚染実態\n汚染菌の性状\n防除対策等\n　
　
牡蠣とヤングコーン中の赤痢菌（<I>Shigella sonnei</I>）検出のために２段階強化された新手法が、共同研究においてBAM（Bacteriological Analytical Manual）/AOAC(Association of Analytical Communities)法と比較された。２１の研究所がこの評価に参加した。各研究所とも、冷蔵または冷凍の牡蠣とヤングコーンに接種された<I>S. sonnei</I>を検出するのに、両方の手法を用いた。<I>S. sonnei</I>の接種量は牡蠣２５ｇ中に０、１４、１４０個、ヤングコーン２５g中に０、１８、１８０個であった。PCR（<I>inv</I>Eと<I>ipa</I>H）による検出率と３種の選択培地上での<I>S. sonnei</I>のコロニーの出現率とが比較された。Welch試験による統計的解析がなされた。牡蠣においては、二つの手法は２０個中１５の試験区において顕著に異なる（ｐ＜０．０５）<I>S. sonnei</I>の検出率を出した。新手法は上記５つ（PCR２条件、選択培地３条件の計５つ）の検出条件に関して、BAM/AOAC法に比べても、冷蔵と冷凍の牡蠣に接種された<I>S. sonnei</I>に対して優れた検出率を示した。両手法は、冷蔵と冷凍ヤングコーン中の<I>S. sonnei</I>の検出では高く似かよった率を示した。これらの結果にもとづけば、新しい２段階の強化手法は食品中の<I>S. sonnei</I>の検出に推奨されうる。
 
