論文 No.：67
タイトル：Identification of the enteropathogens <I>Campylobacter jejuni</I> 
　　　　　and <I>Campylobacter coli</I> based on the cadF virulence gene and its product
筆頭著者：Konkel, M. E.
論文、年、Vol、頁（～）：J. Clin. Microbiol., 1999, 37, 510～517
個表分類：検出法
 
<ITEM1> \n調査の目的
 
<I>C. jejuni</I>と<I>C. coli</I>の付着因子であるCadF蛋白とそれをコードしているcadF遺伝子が種々の野外株から検出可能か調べるため、PCR法、サザンブロット法、イムノブロット法および免疫蛍光染色法による検出を試みた。
その結果、cadF遺伝子とその発現蛋白は供試菌株全てから検出され、市販鶏肉より抽出したDNAから高率にcadF遺伝子を検出した。よってcadF遺伝子とその発現蛋白は<I>C. jejuni</I>と<I>C. coli</I>に広く分布し、PCR法によるcadF遺伝子の検出法は食品からキャンピロバクターを検出する診断法として有用であることが示唆された。
　
<ITEM2> \n検体名
 
<I>C. jejuni</I>　　　40株  
<I>C. coli</I>　　　　6株　　　
その他　　　　6株(<I>Campylobacter</I> hyointestinalis、Helicobacter pylori、<I>Shigella</I> dysenteriae、<I>Escherichia coli</I>、Pseudomonas aeruginosa、<I>Salmonella</I> Typhimurium)
　
<ITEM3>
 
 
　
<ITEM4>
 
 
　
<ITEM5>
 
①PCR法によるcadF遺伝子の検出
②ドットブロットハイブリダイゼーション法によるcadF遺伝子の検出
③ウエスタンブロッティング法によるCadF蛋白の検出
④免疫蛍光染色法によるCadF蛋白の検出
⑤cadF遺伝子の塩基配列の決定
　
<ITEM6>
 
①プライマー cadF-F2B、cadF-R1Bの使用により、<I>C. jejuni</I> (95.0%)、<I>C. coli</I> (83.3%)に400bpのフラグメントが増幅されたが、コントロール群はPCR陰性。　
②ドットハイブリダイゼーションでは全ての<I>C. jejuni</I>、<I>C. coli</I>からcadF遺伝子を検出。　
③PCRの感度は102個。　
④市販鶏肉27検体中26検体でPCR陽性。　
⑤ウエスタンブロッティング法で全ての<I>C. jejuni</I>、<I>C. coli</I>からCadF蛋白を検出。　
⑥免疫蛍光染色法でもウエスタンブロッティング法と同様の結果。　　
⑦cadF遺伝子とその発現蛋白は<I>C. jejuni</I>と<I>C. coli</I>に広く分布し、PCRによるcadF遺伝子の検出は、食品からのキャンピロバクターを検出する診断法として有用と考えられた。
　
<ITEM7>
 
Konkel ME, J Clin Microbiol, 37, 510
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Konkel ME, J Clin Microbiol, 37, 510
