論文 No.：80
タイトル：Occurrence of thermophilic <I>Campylobacter spp.</I> in porcine liver in northern Ireland
筆頭著者：Moore, J.E.
論文、年、Vol、頁（〜）：J Food　Protect 61:409-413(1998)
個表分類：処理場
調査国：アイルランド
 
<ITEM1> \n調査の目的
 
北アイルランドの豚処理場における、豚肝臓のカンピロバクター汚染率と処理場の衛生状態を評価するために一般生菌数と大腸菌群数を調べ、自然汚染した肝臓検体からのカンピロバクター分離能力を調べるために5つの選択培地（Preston agar : PR, Butzler agar : BZ, Balser-Wang agar : BW, Skirrow agar : SK, <I>Campylobacter</I> blood-free selective medium (charcoal cefoperazone desoxycholate agarをmodifyしたもの）: BF)について評価した。
 
<ITEM2> \n検体名
 
肝臓400検体
 
<ITEM3>
 
北アイルランド内の6箇所の豚処理場で、体重95〜100kg（約22ヶ月令）の未経産雌豚及び未去勢雄豚から摘出された肝臓400検体カンピロバクターの検出：内臓摘出直後の豚肝臓の深部組織（約60cm2）を滅菌したナイフで無菌的に切り出し、滅菌アルギン酸スワブで拭き取った。拭き取った検体はCary-Blair transport medium に入れて運搬、採取から3時間以内に処理した。一般生菌数及び大腸菌群数の測定：豚レバー100gを無菌的に採取した。
 
<ITEM4>
 
カンピロバクタ-、一般細菌数、大腸菌群数　
 
<ITEM5>
 
カンピロバクターの検出：スワブを5種類の選択培地（PR, BZ, BW, SK, BF)に2枚ずつ直接接種し、微好気状態、42℃で培養し、24時間間隔で最大5日間カンピロバクターの仮のコロニーができるまで培養。仮のコロニーが出来たら5％羊脱繊血加blood agar no.2 に接種し、前述のように培養。
選択培地の評価：既知濃度の<I>C.jejuni</I> NI 10 ( log108.55 CFU/ml ) を0 CFU/ml になるまで0.1％ペプトン生理食塩水で希釈。希釈液を滅菌アルギン酸スワブで5種類の選択培地に0.1mlづつ接種（希釈段階は不明）し、前述のように培養。判定はｶﾀﾗｰｾﾞ陽性、ｵｷｼﾀﾞｰｾﾞ陽性、発酵又は炭水化物の酸化を行わないことでする。<I>C.coli</I>, <I>C.jejuni</I>はhippurate加水分解テストを用いて区別した。
一般生菌数及び大腸菌群数の測定：肝臓10gをホモジナイズ(2分間）し、0.1％ペプトン生理食塩水で10倍希釈液を調製し、一般生菌数はNutrient agar 培地に接種し、22℃で好気培養し、大腸菌群数はViolet red bile agar（VRBA)に混釈培養（VRBAを5ml重層）し、37℃で24時間培養した。
 
<ITEM6>
 
処理場に搬入された健康畜のうちカンピロバクターは、サンプル平均約6％（1.25〜10％）に存在した。また、60菌株中40菌株（66.7％）から<I>C.coli</I>、60菌株中18菌株（30％）が <I>C.jejuni</I>、60菌株中2菌株（3.3％）が<I>C.lari</I>であった。<I>C.coli</I>が優勢であることから、豚は<I>C.coli</I>のレゼルボアであることが予測された。臨床的に健康な豚肝臓の深部組織にカンピロバクターが存在したことで、肝臓が汚染源となることを示唆している。内臓摘出後の肝臓はプラスチックケースやビニール袋にまとめて入れられるため、交差汚染を受ける機会が多い。一般生菌数及び大腸菌群数はそれぞれ平均で3.6，2.94 CFU/gで低値を示した。これは内臓摘出過程で汚染の程度が低かったことを示している。内臓摘出は手作業で行われるため、腸管の破損が起こりやすい。そのため慎重な内臓摘出がと体と臓器の両方の汚染を減少させるキーファクターとなりうる。今回行われた直接接種では101個まで検出できることが示され、選択培地への直接接種は豚レバーのカンピロバクターの、迅速かつ高感度の分離技術であると考えられた。選択培地の評価では、PRが豚肝臓からのカンピロバクター分離に最も有効な培地の1つであることが示唆された。また、SKは5つの培地の中で最も低い選択性であることが認められた。PRやSKではコンタミは観察されなかった。BZは最も選択性があるが、PRやSKよりも感度が低い。また、PRとBFは<I>C.coli</I>と<I>C.jejuni</I>の分離に最も有効であることが示唆された。選択培地の阻止性は、培地に含まれた抗生物質に対する野外株の感受性の違いによるため、少なくとも2種類の選択培地を用いて分離を行うのがよいと考えられる。この研究ではBWとSKの組み合わせが、豚のカンピロバクターの分離に最適であることが示された。
 
<ITEM7>
 
Moore J E, J Food Protect, 61, 409
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Moore J E, J Food Protect, 61, 409