論文 No.：85
タイトル：Serotypes and Typability of <I>Campylobacter jejuni</I> and <I>Campylobacter</I>
　　　　　coli isolated from poultry products
筆頭著者：Nielsen, E..M.
論文、年、Vol、頁（〜）：Int J Food Microbiol 46:199-205 (1999)
個表分類：販売店
調査国：デンマーク
　
<ITEM1> \n調査の目的
 
デンマークのMunicilpal Food Control Unitsによって、春から秋にかけて、全国的なサーベイランスが行われた。デンマークの小売りの段階の家禽生産物を対象に<I>Campylobacter jejuni</I>と<I>Campylobacter coli</I>を分離、型別した。
　
<ITEM2> \n検体名
 
小売りの段階の家禽生産物　[チキン（足、羽、肝臓等）、ターキー（切り身や心臓）、プーサン、野鳥（ワイルドダッグ、キジ、鳩）、ダックの胸または足、ウズラ、ギニア鶏]
　
<ITEM3>
 
小売りの段階の家禽生産物　[チキン（足、羽、肝臓等）、ターキー（切り身や心臓）、プーサン、野鳥（ワイルドダッグ、キジ、鳩）、ダックの胸または足、ウズラ、ギニア鶏] 家禽生産物　25g。
86のチキン（足、羽、肝臓等）、29のターキー（切り身や心臓）、16羽のプーサン、10羽の野鳥（7羽のワイルドダッグ、2羽のキジ、2羽の鳩）、8羽のダックの胸または足、4羽のウズラ、3羽のギニア鶏。
　
<ITEM4>
 
カンピロバクター
　
<ITEM5>
 
＜分離＞
分離はmodified NMKL-procedureを用いて行われた。
要約すると、25gのサンプルをプレストンで24℃42時間増菌培養後、10μlをmCCDA培地に接種し、24-48時間微好気培養した。分離株は、5%馬血液加blood agar base 2で二次培養した。位相差顕微鏡にて形態、運動性を確認し、グラム染色、カタラーゼ、オキシダーゼ、馬尿酸分解、インドール試験、ナリジスク酸、セファロチン感受性試験で種レベルまで同定した。これらの分離菌は15％グリセロール加nutrient brothにて保存し、血清型別試験に供した。

＜血清型別＞
Pennerの方法（heat-stable antigen）を用い、O抗原型別を行った。抗血清は3段階（1:80,1:640,1:5120）で、反応の観察された最低希釈倍数を陽性とした。抗血清は66の標準株を用いて作成した。この試験は47の<I>Campylobacter jejuni</I>抗血清および19の<I>Campylobacter coli</I>抗血清を用いて行った。抗原は凍結分離株から培養し、作成した。
　
<ITEM6>
 
分離された156株のうち、133株（85.3%）が<I>Campylobacter jejuni</I>で、23株(14.7%)が<I>Campylobacter coli</I>だった。<I>Campylobacter coli</I>に関しては、6-10%がチキン、プーサン、野鳥から、24.1%がターキーから、33.3%が残りである（ダック、ウズラ、ギニア鶏）。<I>Campylobacter jejuni</I>は、28の血清型に型別された。<I>Campylobacter coli</I>は、11の血清型に型別された。<I>Campylobacter jejuni</I>の中で最も多かった血清型ははO:2であり、30%を占めていた。<I>Campylobacter coli</I>では、O:46,O:24,O:59が多かった。
主な血清型は、生産物によって異なっている。チキンにおいては、O:2, O:1,44 O:4complex, O:6,7の4グループが主で、ブロイラーにおいても同様であった。それに対し、ターキーやプーサンからの生産物は、O:2が主であった。これらは、限られた生産者が原因になっているのかもしれない。FrickerとParkがイギリスで行った家禽生産物の調査ではO:8が多かったが、我々の調査ではO:8は存在しなかった。しかし、O:1,O:2,O:4はイギリスと同様に主な血清型であった。凍結分離株から二次培養して血清型別を行ったが、初めは16%の株が型別不能であった。これは、他の対象物から分離した時より、明らかに多かった。その理由として、分離株がストレスによってO抗原を発現できなかったのではないかと推察される（たとえば、長時間高い酸素分圧にさらされたとか、乾燥状態であったとか、温度変化があったとか）
Jacobs-Reitsma et al.(1995)は、凍結分離株は、分離直後に比べて、血清型別しづらくなっていると報告している。彼らは、我々と同じく、数回の二次培養によって、型別不能株を型別している。我々は、2回の二次培養によって、型別不能株の64%が型別できた。5回の二次培養を行うと、さらに型別可能な株が増えた。しかし、さらに10回まで行っても、型別能には、ほとんど変化がなかった。型別不能株を二次培養することで型別可能になる理由は不明であるが、食品や冷凍液の中で、長期間保存したものは有機物にダメージが起こるからかもしれない。食品の方が糞便よりも型別不能株が多く分離されることも、それらの理由によるかもしれない。
　
<ITEM7>
 
Nielsen EM, Int J Food Microbiol, 46, 199
　
<PUBMED>

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Entrez/query?form=4&db=m&Term=Nielsen EM, Int J Food Microbiol, 46, 199