論文 No.：J30
タイトル：MPN法および直接平板塗抹法による市販鶏レバーのカンピロバクターの定量検査
筆頭著者：小野一晃
論文、年、Vol、頁（～）：日獣会誌 55:447-449 (2002)
個表分類：販売店
調査国：日本（埼玉県）
 
<ITEM1> \n調査の目的
 
①市販鶏レバーのカンピロバクターの汚染菌数の把握　
②市販鶏レバーについて，MPN法と直接平板塗抹法（以下，塗抹法）を併用してカンピロバクターを定量的に検査し，両法の結果を比較することにより菌数測定に適した検査法についての検討　
③菌の局在（レバー表面と内部のどちらに菌が存在するのか）
 
<ITEM2> \n検体名
 
市販国産鶏レバー56検体
 
<ITEM3>
 
 
 
 
<ITEM4>
 
カンピロバクター
 
<ITEM5>
 
塗抹法とMPN法を併用してカンピロバクターの定量検査を行った．①塗抹法では，検体25gに100mlのPreston培地（ニュートリエントブイヨンNo.2にプレストンカンピロバクター選択サプリメントとカンピロバクター発育サプリメントを添加し，5％量の馬脱繊維血液を加えた）を加えて5倍乳剤を作製し，約1分間ストマッカー処理を行った．この1mlを5枚のCCDA培地（カンピロバクター血液無添加選択カンテン培地にCCDAサプリメントを添加）に0.2mlずつコンラージ棒で塗抹し，42℃，48時間微好気状態（N2:85%, CO2:10%, O2:5%）で培養後，培地上の疑わしいコロニーを同定した．カンピロバクターのコロニー数をカウント（5枚の平板を合計）し，得られた値を5倍して1g当たりの菌数とした．1平板当たり1000コロニーを越えた場合には全自動コロニーカウンターc)で計測した．また，各検体当たり2コロニーについて，常法に基づきカンピロバクターの種の同定を行った．
次に，②6段階(A-F)の試料液について，MPN（3管）法を行った．上述のPreston培地による5倍乳剤10mlを3本の空の試験管に分注し（A），さらに，滅菌生理食塩水で10倍段階希釈した5段階（B-F）の試料液各1mlを10mlのPreston培地の入った試験管3本にそれぞれ接種した．すべての試験管を42℃，24時間微好気培養後，各々1白金耳をCCDA培地に塗抹し，さらに，42℃，48時間微好気培養した．培地上の疑わしいコロニーを同定し，各段階希釈（A-F）における試験管のカンピロバクター陽性本数を最確数表に当てはめ，得られた値を5倍し，検体100g当たりのMPN値を求めた．最終的には1g当たりの菌数に換算して，塗抹法と比較した．また，各検体当たり2コロニーについて，カンピロバクターの種の同定を行った．
 
<ITEM6>
 
表に市販鶏レバーのMPN法および塗抹法によるカンピロバクターの菌数別検体数を示す．MPN法では103cfu/g以下のものが82.1％（46/56）を占め，10E3オーダー（cfu/g）が7.1％（4/56），10E3cfu/g以上が10.7％（6/56）であった．一方，塗抹法では平板上にカンピロバクターの発育を認めなかったものが33.9％（19/56）あり，10E2cfu/g以下のものが76.8％（43/56）を占め，10E3オーダー（cfu/g）が14.3％（8/56），10E3cfu/g以上が8.9％（5/56）であった．塗抹法では10E4オーダー（cfu/g）の菌数を測定することができ，最も高い値はおよそ2.0×10E4cfu/gであった．また，両法とも，分離されたカンピロバクターはすべて<I>C. jejuni</I>であった．
さらに，カンピロバクターの汚染がレバー表面と内部のいずれに存在するかを調べたところ，表面のふきとり検体の86.7％（13/15）から，レバー内部の33.3％（5/15）から菌が分離され，すべて<I>C. jejuni</I>であった．
 
<LIST1>

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